Efectos De La Temperatura Y Ph Sobre La Actividad Enzimática De La Catalasa

Efectos de la Temperatura y pH sobre la actividad enzimática de la Catalasa
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CALDERON FERNANDEZ, Pierre

INTRODUCCIÓN
En ausencia de oxigeno los primeros seres vivos poseían sistemas anaeróbicos. Por tal motivo el metabolismo de las primeras bacterias fotosintéticas comenzaron a liberar constantemente oxigeno al ambiente, a causa de estolos organismos circundantes tuvieron la necesidad de adaptarse cada vez más a la presencia de oxigeno, convirtiéndolos en sistemas aeróbicos. Este nuevo metabolismo adquirido produjo la aparición de moléculas radicales (O2, OH-, H2O2 y O2-) las cuales tienen efectos dañinos en la célula. Como respuesta a esto, el organismo desarrollo un sistema de protección antioxidante formado por enzimas ycompuestos cuya función es descomponer dichas moléculas radicales en productos menos nocivos para la célula (Céspedes et al , 2006 ).
La enzimas más abundante en este medio es la catalasa, enzima proteica reutilizable localizada generalmente en las mitocondrias y en los peroxisomas. Su función principalmente es acelerar la descomposición del peróxido de hidrogeno (H2O2) en oxigeno y agua (Campbell ,2007).

Dada la importancia de esta enzima y la variación dependiendo de las características del medio en el que se encuentre, el presente trabajo tiene como objetivo verificar su reutilización y determinar cuales son las condiciones optimas para su funcionamiento mediante factores de variación de pH y de temperatura en muestras tanto de tejido animal como en tejido vegetal.

MATERIALES YMETODOS
Para medir los efectos de la enzima se utilizo la siguiente escala (INDICE DE REACCION):
O: no hay reacción
1: Reacción poco visible (burbujeo mínimo)
2: Reacción evidente (burbujeo abundante)
3: Reacción fuerte (burbujeo abundante y a velocidad)
4: Reacción muy fuerte (burbujeo abundante a velocidad que produce espuma que rebalsa el tubo)

a) Identificación de la catalasa:
En eltubo N°1 se colocaron 3 ml de agua destilada la cual se uso como control , en el tubo N°2 una cantidad de hígado trozado, en el tubo N°3 una cantidad de tomate trozado, en el N°4 hígado triturado y en el tubo N°5 ,tomate triturado. Posteriormente se añadió a cada tubo 3 ml de agua oxigenada (H2O2).
a) Reutilización de la enzima :
Se colocó en el tubo N°6 , 1 ml de la cantidad sobrante del tuboN°2 , posteriormente se añadió 3 ml de peróxido de hidrogeno (H2O2).
b) Desnaturalización de la catalasa
I)Efecto de la temperatura (alta): en el tubo N°7 se colocaron 3 ml de control y en el tubo N° 8 una pequeña cantidad de hígado triturado, se expusieron ambos a baño maría en agua hirviendo en un lapso de 5 minutos aproximadamente. Luego se retiraron los tubos expuestos y se dejaronenfriar , posteriormente se añadió en ambos tubos 3 ml de agua oxigenada(H2O2).
TEMPERATURA | TEMPERATURA(1OOC°) | TEMPERATURA(37C°) | TEMPERATURA (4C°) |
TUBO | CONTROL | HIGADO TRITURADO | CONTROL | HIGADO TRITURADO | CONTROL | HIGADO TRITURADO |
INDICE DE REACCION | 0 | 1 | 0 | 4 | 0 | 3 |
II) Efecto de la temperatura (baja): en el tubo N°9 se colocaron 3 ml del control y en el tubo N°10 unacantidad de hígado triturado, se expusieron ambos en agua con hielo durante 5 minutos aproximadamente. Luego se
extrajeron los tubos y se agregó en ambos 3 ml de agua oxigenada (H2O2).
III) Efecto del pH ácido: en el tubo N° 11 se colocaron 3 ml de control y en el tubo N°12 una cantidad de hígado triturado, luego se añadió en ambos 1ml de HCl 1N , posteriormente se mezclo el contenido y seañadió a cada tubo 3 ml de agua oxigenada(H2O2).
IV) Efecto del pH básico: en el tubo N°13 se colocaron 3ml de agua destilada y en el tubo N°14 una cantidad de hígado triturado. Se añadió a cada tubo 1ml de NaOH 1N agitando la mezcla. Posteriormente se colocó 3ml de peróxido de hidrogeno (H2O2) a cada tubo.

RESULTADOS
Tabla#1 Identificación de la catalasa
TUBO | CONTROL | HIGADO EN...