Egf-r en células del sistema nervioso central de ratas adultas

Epidermal Growth Factor Receptor in Synaptic Fractions of the Rat Central Nervous System
Receptor del Factor de Crecimiento Epidermal en Fracciones del Sistema Nervioso Central de Rata

VíctorFaúndez, Raúl Krauss, Loreto Holuigue, Jorge Garrido, and Alfonso González

EGF-R

170 kDa

http://commons.wikipedia.org/wiki/File:EGFR_signaling_pathway.png

Problemática
• Investigaciones invitro de EGF-R en glías.
¿Es posible realizar ensayos de determinación en tejidos frescos? ¿Se encuentra presente en otros sectores de sistema nervioso?

• Ratas neonatales.
¿En ratas adultasexiste EGF-R?

• Efecto no comprobado de EGF.
¿Hay actividad transduccional de EGF-R inducido por EGF?

Presencia EGF-R en tejido neuronal de ratas adultas

* 170 kDa

Fig. 1 Polyclonalantibodies against
liver EGF-R.
CB: Coomassie Blue, EGF-Affi-Prep (1). Antibodies of immunized rabbits that recognize the EGF-R (2)(3).

Fig. 2 Affinity chromatograpy of EGF-R
in brain homogenates.
A)CB. EGF-AffiPrep (2). BSA-Affi-Prep (3). B) Concavalin Aperoxidase blot . EGF-Affi-Prep (5). C) Immunoblot. Brain eluate from EGF-Affi-Prep column (6). Isolated rat liver EGF-R (7).Inmunohistoquímica para distintas áreas del tejido cerebral

Fig.3 Inmunohistochemistry of EGF-R in neonatal and adult rat brain. a: Glial cells; b y c: Brain Cortex;
d:Hippocampus; e: Cerebellar Cortex.Micrografía electrónica de cerebro de rata.

Fig.5 ¹²³I-EGF binding to synaptosomas.
Tissue linearity (A) and temporal progress (B).

Fig. 4 Electron micrographs of rat brain subcellular
Percoll stepgradient fractions. Sections of myelin (a),
light synaptosomes (b), heavy synaptosomes (c), and mitochondrial (d) synaptosomes from neonatal rat brain (e).

Sitos de unión específico y constantede asociación
Fig.6 Binding of
different ¹²³I- EGF concentrations to rat brain synaptosomes under equilibrium conditions

Análisis de Scathchard Alta Afinidad Kd: 1,42x10¯¹⁰ ± 0,58 M Baja...