Ejercicio experimental 1

Laboratorio de Inmunología General
Semestre 2011-1
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EJERCICIO EXPERIMENTAL No I.
Identificación de las células del sistemainmunitario en sangre total
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OBJETIVO
Identificar los diferentes componentes celulares de la respuesta inmune en sangre periféricahumana a través de sus características morfológicas y de afinidad por colorantes.
¿CÓMO?
A través de una tinción basada en la tinción de Romanowsky modificada por Wright que se
describe acontinuación:
MATERIALES
• Microscopio óptico
• Portaobjetos
• Lanceta estéril
• Cronómetro
• Torundas
• Aceite de inmersión
• Colorantes de DADE Diff-Quik ®.
Solución fijadora: 1.8 g/L Triarilmetano en alcoholmetílico
Solución I: 1 g/L Xanteno
Solución II: 1.25 g/L Thiazine (Mezcla de 0.625 g/L de azur A y 0.625 g/L de azul
de metileno)
TÉCNICA
1. Limpiar el dedo pulgar (de la mano que menos ocupe la personavoluntaria) con agua y
con jabón. Desinfectarlo posteriormente con alcohol.
2. Con la lanceta estéril realizar una punción en la parte apical del dedo de forma paralela a la
huella digital del dedopulgar.
3. Depositar una gota de sangre de (aproximadamente 40 µl) en un extremo de un
portaobjetos.
4. Colocar un portaobjetos como indica el dibujo y deslizarlo sobre toda la superficie delportaobjetos de manera que se pueda obtener una fina película de sangre (monocapa). El
porta absorbe la gota y la arrastra, pero sin pasar nunca por encima de ella para no dañar
las células. Dejar secar atemperatura ambiente.

C.L.M
M.A.M

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Semestre 2011-1
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5.
6.
7.
8.

Colocar el frotis de sangre sobrela bandeja de tinción.
Cubrir con 500 µL de Diff-Quik Fixative (solución fijadora) dejar actuar durante 1 minuto.
Escurrir la solución e inmediatamente colocar 500 µL de Diff-Quik Solución I...