EJERCICIOS SEGUNDO EXAMEN PARCIAL DE M TODOS DE AN LISIS
Páginas: 3 (724 palabras)
Publicado: 24 de junio de 2015
EJERCICIOS
1) Se aisló un metabolito M de líquido cefalorraquídeo (LCR). Después de la excitación a 280 nm, el material fluoresció a 360 nm. Usando un espectrofluorómetro estándar:
a) La escala delinstrumento fue ajustada a cero con el solvente y la marca del 100 % fue ajustada usando una muestra pura de M como estándar (conc. 100 ng/100 mL)
b) Se midió la lectura de un blanco de una soluciónque contenía todos los componentes excepto M y dio una lectura de 11.2%.
c) Un extracto, incluyendo M dio una lectura de fluorescencia de 67 %.
d) Se obtuvo una lectura de fluorescencia de 92% cuandoel extracto se mezcló con el metabolito puro (estándar interno) que contenía 100 ng/100 mL).
Calcular la concentración de M en la muestra de LCR en µg/100 mL y el porcentaje de apagamiento, si es queexistiera. Establezca el desplazamiento de Stokes en el ensayo.
2) Se trató una muestra de 5 mL de sangre con ácido tricloroacético para precipitar las proteínas. Después de centrifugar, ladisolución resultante se llevó a pH de 3 y se procedió a una extracción con dos porciones de 5 mL de metilisobutilcetona conteniendo el agente orgánico acomplejante de plomo APCD. El extracto se aspiródirectamente a una llama de aire/acetileno, dando una absorbancia de 0.444 a 283.3 nm. Se trataron de la misma forma alícuotas de 5 mL de disoluciones patrón conteniendo 0.25 y 0.45 ppm de plomo, dandoabsorbancias de 0.396 y 0.599, respectivamente. Calcular las ppm de plomo en la muestra asumiendo que se cumple la ley de Beer.
3) Se puede utilizar la disminución de la fluorescencia del triptofano por elyoduro para determinar si los triptófanos están o no expuestos al disolvente. Si se conoce que una proteína tiene un solo triptófano y el yoduro es incapaz de producir disminución de la fluorescencia¿Qué posibles explicaciones se pueden dar de este hecho? Si la proteína contiene 8 triptofanos y el yoduro disminuye un 25 % de la fluorescencia, es tentador suponer que 2 de los triptofanos están...
1) Se aisló un metabolito M de líquido cefalorraquídeo (LCR). Después de la excitación a 280 nm, el material fluoresció a 360 nm. Usando un espectrofluorómetro estándar:
a) La escala delinstrumento fue ajustada a cero con el solvente y la marca del 100 % fue ajustada usando una muestra pura de M como estándar (conc. 100 ng/100 mL)
b) Se midió la lectura de un blanco de una soluciónque contenía todos los componentes excepto M y dio una lectura de 11.2%.
c) Un extracto, incluyendo M dio una lectura de fluorescencia de 67 %.
d) Se obtuvo una lectura de fluorescencia de 92% cuandoel extracto se mezcló con el metabolito puro (estándar interno) que contenía 100 ng/100 mL).
Calcular la concentración de M en la muestra de LCR en µg/100 mL y el porcentaje de apagamiento, si es queexistiera. Establezca el desplazamiento de Stokes en el ensayo.
2) Se trató una muestra de 5 mL de sangre con ácido tricloroacético para precipitar las proteínas. Después de centrifugar, ladisolución resultante se llevó a pH de 3 y se procedió a una extracción con dos porciones de 5 mL de metilisobutilcetona conteniendo el agente orgánico acomplejante de plomo APCD. El extracto se aspiródirectamente a una llama de aire/acetileno, dando una absorbancia de 0.444 a 283.3 nm. Se trataron de la misma forma alícuotas de 5 mL de disoluciones patrón conteniendo 0.25 y 0.45 ppm de plomo, dandoabsorbancias de 0.396 y 0.599, respectivamente. Calcular las ppm de plomo en la muestra asumiendo que se cumple la ley de Beer.
3) Se puede utilizar la disminución de la fluorescencia del triptofano por elyoduro para determinar si los triptófanos están o no expuestos al disolvente. Si se conoce que una proteína tiene un solo triptófano y el yoduro es incapaz de producir disminución de la fluorescencia¿Qué posibles explicaciones se pueden dar de este hecho? Si la proteína contiene 8 triptofanos y el yoduro disminuye un 25 % de la fluorescencia, es tentador suponer que 2 de los triptofanos están...
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