EL 5 DE JUNIO DIA DEL LIBERALISMO


Estudio de las células y los tejidos



METODOS DE ESTUDIO DE LA MORFOLOGIA CELULAR
1. Estudio de las células vivas: Método “in vivo”: se realiza a organismos o células vivas en su estado natural incluso orgánulos celulares. Se utilizan colorantes llamados colorantes vitales, estos no causan daño al organismo o célula durante un tiempo corto, a largo plazo son tóxicos y mortales.
Método“in Vitro”: estudia al organismo vivo pero colocado en condiciones artificiales. Se realiza en células aisladas y fáciles de separar. Estas células se colocan sobre un sustrato adecuado que se llama medio de cultivo en el cual se mantienen con vida mientras dura el estudio conocido como cultivo celular.
2. Estudio de celulas muertas
A) FIJACIÓN: cuando el animal muere es necesario detener susprocesos vitales antes de una autolisis de sus materiales. Este proceso es conocido como fijación. Conserva las células y tejidos en un estado lo mas parecido posible en morfología y composición química al estado vivo.
Modo de actuación:
1. Se insolubilizan las proteínas
2. Evita autolisis de los constituyentes de las células debido a sus propias enzimas desprendidas por los lisosomas de lascélulas.
3. Protege a las células del ataque bacteriano.
4. el tejido para posteriores tratamientos como la tinción, el corte…
Fijación física:
Por calor: aplicamos calor de manera que se produce la coagulación de las proteínas. No es buena ya que las células se destruyen.
Por frío: se congela el tejido con dióxido de carbono o N liquido. Es mejor que la anterior pero se pueden formar cristales.Fijación química: (por medio de sustancias químicas disueltas)
1. Un solo liquido fijador:
Microscopia OPTICA: Bouin: formado por una mezcla de formaldehído, ácido acético y ácido pírico.
Formaldehído: produce la reticulación de proteínas
Ac. Acético: cambia el estado coloidal de las proteínas.
Ac. Pírico y dicromato potasico: actúan formando sales.
2. Mezclas fijadoras:
MicroscopíaELECTRONICA: Se utiliza glutaraldehido mezclado con paraformaldehido
Glutaraldehido: reticulación de proteínas
Tetraoxido de Osmio: reticulación de proteínas.
Tipos de fijación química:
Perfusión: se coloca el fijador en una jeringuilla inyectándoselo al animal en el torrente sanguíneo de manera que el fijador se distribuye por todo su organismo. Una vez fijado podemos abrirlo para obtener nuestroórgano.
Inmersión: se mete el órgano en un recipiente con fijador. Esta técnica depende del tamaño de la muestra el volumen del fijador y todo esto influirá en el tiempo de fijación.
La fijación tb depende de la velocidad de penetración del fijador (tetraóxido de osmio lento, formaldehído rapido). El tejido debe sacarse del fijador ya que el fijador puede estropearlo. Después de sacar el tejidorealizaremos la inclusión.

FIJADORES SIMPLES
Existen multitud de fijadores en los manuales de técnicas histológicas. Aquí sólo trataremos aquellos que consideramos de uso más común para la observación de tejidos al microscopio, es decir, aquellos que mejor preserven la estructura celular. Los fijadores químicos son los más frecuentemente empleados, bien con un solo tipo de sustancia fijadora ocon mezclas de varias de ellas.
¡Atención! La mayoría de las sustancias fijadoras son tóxicas por inhalación o por contacto, algunas de ellas cancerígenas. Hay que seguir las indicaciones de seguridad para su manejo y utilización.
Fijadores simples Alcohol etílico. Fija por deshidratación y se usa entre el 70 y 90 %. Es un buen elemento para preservar moléculas, como ciertas enzimas,propiedades antigénicas, glucógeno, pigmentos y para las extensiones citológicas. Debido a que deshidrata, a la vez que fija, se puede usar también como un conservante de las muestras. Tiene inconvenientes como el endurecimiento y la retracción de los tejidos. Carece de efecto mordiente.


Etanol: CH3-CH2-OH


Ácido acético. Su proceso de fijación consiste...