EL FACTOR DE CRECIMIENTO NERVIOSO

EL FACTOR DE CRECIMIENTO NERVIOSO
Durante el desarrollo del SN de los vertebrados se produce un exceso de neuronas que proyectan sus axones hacia el mismo blanco (neuronal o no). Las poblaciones celulares inervadas producen cantidades limitadas de ciertas moléculas proteicas (NT), las cuales permiten la supervivencia de una fracción de las neuronas: aquellas que lograron captar y transportarretró- gradamente un número suficiente de estas proteínas [15]. Este proceso asegura que las células blanco estén inervadas por el número y tipo correctos de fibras nerviosas. Además de permitir la supervivencia, las NT están implicadas en la proliferación, diferenciación y crecimiento axónico de las neuronas del SN en desarrollo [7]. Sin embargo, el efecto neurotrófico no es un fenómeno limitado alos estadios embrionarios; las neuronas del organismo adulto demandan, para conservar su funcionamiento, un suministro estable de NT [8]. El NGF es el miembro más estudiado de la familia de las NT [12,16]; se descubrió a través de una serie de experimentos conducidos por Rita Levi-Montalcini, Viktor Hamburger y Stanley Cohen, que culminaron con el aislamiento de la proteína y la producción delprimer antisuero anti-NGF [13]. Estructura del NGF El análisis de la secuencia de nucleótidos del gen para el NGF de diferentes especies ha mostrado que esta proteína está muy conservada en la escala filogenética [17]. La estructura primaria del NGF de ratón (NGFm) es muy similar a la del ser humano; sólo 12 de 118 aminoácidos son diferentes [18]. El NGF se ha aislado y purificado a partir de laglándula submaxilar de ratón, que constituye la fuente natural más abundante de esta proteína [19]. Esta proteína está constituida por un complejo pentamérico con dos subunidades α, una subunidad β y dos subunidades γ, todas asociadas no covalentemente. La subunidad β (β-NGFm), que es la responsable de la actividad biológica del NGF, es un homodímero de 118 aminoácidos y 26,5 kDa. La proteína comienzaen la porción amino terminal con serina y termina con arginina en la porción carboxilo terminal. Cada cadena del homodímero presenta tres puentes disulfuros intracatenarios y se asocia con la otra cadena a través de interacciones no covalentes [19]. Se ha comunicado que las subunidades α y γ podrían estar vinculadas con la regulación de los procesos de liberación y degradación del β-NGFm y brindarprotección contra la acción de proteasas [20]. Existen dos metodologías generales para el aislamiento del β-NGFm: la primera, a partir del complejo pentamérico [21,22], y la segunda, a partir del homogenizado de glándula submaxilar sin previa separación del complejo [23]. La utilización de esta última metodología ha revelado como fuentes fundamentales de contaminación la renina y las γ-globulinasde ratón, así como modificaciones en los extremos de la prote- ína, tales como la pérdida de la arginina en el extremo C-terminal y la pérdida de ocho aminoácidos en el extremo N-terminal. Estas modificaciones ocurren al azar en la población molecular purificada y no alteran la actividad biológica del producto [20]. Receptores Como otros factores de crecimiento, el NGF exhibe su efecto biológicodespués de interactuar con su receptor específico en la superficie de la célula. La estructura de los receptores está formada por tres dominios: extracelular, transmembrana e intracelular. La porción extracelular contiene los sitios de unión al ligando, mientras que el dominio intracelular contiene una unidad de señalización definida, una tirosina cinasa [24]. En general, se han caracterizado dostipos de receptores para las NT. Uno, de baja afinidad, se denomina p75 y se expresa en las neuronas y las células gliales. Sus principales funciones son la regulación de la apoptosis neuronal, el transporte retrógrado de NT, la cooperación con los receptores de alta afinidad en la unión a las NT y el secuestro de las NT circulantes [25-31]. El otro tipo de receptor, el de alta afinidad,...