Elaboración de fases acuosas

Protocolo para la elaboración de sistemas de dos fases acuosas
Diagrama de fase de etanol y fosfato dipotásico de hidrógeno
Método de tritación
Consiste en la preparación de una serie desistemas que son preparados y después tritados hasta que se forma un sistema de una fase, la binodal se encuentra justo encima de este punto

* Se preparan varias soluciones de K2HPO4 stock adiferentes concentraciones y se añaden 5ml en tubos falcon.
* Se añade una gota de etanol en el tubo colocado en una balanza analítica para medir la cantidad añadida de etanol.
* Después de agregarcada gota la mezcla se coloca en el vortex por 3 minutos.
* Cuando una gota de etanol causa que la mezcla se vuelva turbia (lo cual indica la presencia de la segunda fase), pero la segunda gota nocausa deposición, el punto en el cual la mezcla estaba turbia es el punto de turbidez.
* La cantidad total de etanol es medida a través de su peso y las concentraciones de etanol y sulfato deamonio a diferentes puntos de turbidez fueron calculadas con las siguientes ecuaciones.

* Donde w1 y w2 representan la fracción masa de etanol y fosfato dipotásico respectivamente; m1, m2 y m3representan la cantidad añadida de etanol, fosfato y agua respectivamente.
* Los datos obtenidos de estos cálculos se utilizan para graficar los diagramas de fase.

Nota: Las soluciones stock defosfato deben estar en el rango de 30-40% (w/w), esta sala debe ser de grado analítico. Para tener una mayor exactitud, todos los stocks deben ser analizados utilizando un método apropiado, para el stockde sal de recomienda la conductividad.

Partición del ácido láctico en SDFA etanol/K2HPO4
1. Agita muy bien las soluciones stock hasta que no tengan gradientes de densidad.
2. Agrega elclarificado del filtrado para formar los sistemas de dos fases acuosas consistentes de 8-30% (w/w) de etanol y 16-30%(w/w) de fosfato. (Las soluciones deben agregarse al tubo en orden ascendente de...