Electroforesis capilar

TEMA: BIOQUIMICA Y FISICOQUIMICA

Electroforesis capilar
Juan Miguel Castagnino 1 Adaptación de la Conferencia presentada en el Congreso CUBRA IV, 1997, San Miguel de Tucumán, Argentina. Reimpresión del artículo publicado en Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana Vol. XXXIII, No. 3, 297-329, 1999. RESUMEN En el presente trabajo se detallan los principios físico-químicos básicos que rigen laseparación de sustancias en la electroforesis capilar. Se destaca el aporte que ha significado el desarrollo de los capilares de 20 a 50 µm de diámetro, de los detectores con arreglos de diodos y la operativa computacional para la interpretación gráfica de los datos obtenidos. Se detallan los principios que rigen la electroforesis libre, zonal, isotacoforesis, isoelectroenfoque y cromatografíamicelar con surfactantes y ciclodextrinas, y distintos ejemplos sobre sus aplicaciones. Palabras clave: electroforesis capilar, electroforesis zonal, isotacoforesis, isoelectroenfoque, micelar, cromatografía electrocinética, surfactantes, ciclodextrinas. Historia. Definición de electroforesis. Electroforesis capilar. Breves nociones teóricas. Corriente electroendosmótica. De la electroforesis en papelde filtro a la electroforesis capilar. El aparato para electroforesis capilar (EC). Aplicaciones. Desarrollos tecnológicos que contribuyeron a la EC. Electroforesis capilar:Ventajas/Volúmenes empleados/ Instrumentación/ Principios fisicoquímicos/Capilares. Siembra de las muestras Voltajes/Eficacia de la separación/Polaridad/Detección. Reactivo en electroforesis capilar Selección de buffers. Tablade buffers. Buffers zw. Buffers zwitteriónicos. Aditivos. ABSTRACT In the present work the basic physical-chemical principles that govern the separation of substances in the capillary electrophoresis are detailed. The contribution of the development of the capillaries of 20 to 50 µm of diameter, of the detectors with diodes-arrays and the operative computacional for the graphic inter-pretation ofthe obtained data is highlighted. The principles are detailed thad govern the free, zonal electrophoresis, isotachophoresis, isoelectroenfoque and micelar chromatography with surfactantes and ciclodextrinas, and different examples on their applications are detailed. Key words: capillary electrophoresis, zonal electrophoresis, isotacophoresis, isoelectroenfoque, micelar electrocineticchromatography, surfactantes, ciclodextrinas. Surfactantes. Sectores quirales. Ciclodextrinas Relaciones de la química supramolecular/Ciclodextrinas (CD) o (CDs)/ Estructura espacial de las CD/La conicidad/La cavidad/Uniones químicas entre el huésped y las CD. Las principales propiedades de las ciclodextrinas nativas. Tipos de electroforesis capilar. MECK o MECC (Electroforesis micelar electrocinética).Micelas. Clases de surfactantes y propiedades. Separación de especies neutras. Electroforesis capilar en gel (CGE o ECG). Capilares. Aplicaciones. Isoelectroenfoque capilar. Isotacoforesis. Aplicaciones de la isotacoforesis. Aplicaciones de la electroforesis capilar. Electroforesis capilar en zonas (CZE) ECIF (O CIEF) / Tamizado molecula/ MEEC. Electrocromatografía micelar. Cromatografía micelarelectrocinética. MEEC/ Definición/Resumiendo/ Efectos de aditivos en la fase acuosa/ Principio de separación con la ciclodextrina/ Pares iónicos/ Urea/ Modificadores orgánicos. Referencias bibliográficas.

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Doctor en Química. Exprofesor Titular de Análisis Biológicos. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. UBA.

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Correspondencia: Dr. JuanMiguel Castagnino, Calle 6 No. 1344, 1900- La Plata. Argentina. E-mail: secgral@fbpba.org.ar

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BIOQUIMIA VOL. 25 NO. 1 - 98 - 2000

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HISTORIA El desplazamiento de sustancias bajo la acción de un campo eléctrico fue citado por Reuss en 1809 en las memorias de la Sociedad Imperial Natural (Moscow) (1809) 1. Allí se describe la experiencia de la fig. 1, donde...