electroforesis en gel de agarosa
Páginas: 3 (565 palabras)
Publicado: 5 de abril de 2013
AISLAMIENTO DE DNA HUMANO
ANDERSON RAMÍREZ AYALA. M.Sc
INTRODUCCIÓN
La biología molecular ha aparecido como una necesidad de explicar, a nivel molecular los fenómenos relacionados con lavida. Algunos de los aportes científicos más relevantes en la aparición de la biología molecular fueron los resultados de los trabajos de Avery y colaboradores, Martha Chase y Watson y Crick, entreotros.
A través de la genética mendeliana se pueden predecir mediante cálculos probabilísticos los valores de riesgo de padecimiento de una patología genética, identificando los genotipos de losindividuos necesarios para el análisis.
El ADN tiene la ventaja de ser idéntico a nivel molecular en cada estructura que se encuentre, sin importar sin son virus (con algunas excepciones), organismosprocarioticos o eucarióticos, lo cual permite la aplicación de una serie de técnicas que logran su identificación a nivel de secuencias específicas que caracterizan especies e incluso individuos.A nivel humano, existe la necesidad de obtener ADN de un amplio espectro de muestras biológicas tales como sangre, hueso, músculo, piel, semen o saliva, etc.
En la sangre se pueden encontrarsecuencias de ADN correspondientes al individuo donador de la muestra o algunos parásitos que suelen encontrarse en el torrente sanguíneo tales como el tripanozoma y la leishmania, entre otras.OBJETIVO
Obtener ADN a partir de una muestra de sangre periférica humana empleando el kit comercial, Wizar Genomic de Promega.
METODOLOGÍA
Lisis de glóbulos rojos
1. Usando los volúmenes dela tabla anterior combine los volúmenes apropiados de solución de lisis celular y sangre. Mezcle por inversión.
2. Incubar por 10 minutos.
3. Centrifugar:
< 300 ul de la muestra 13.000 – 16.0000rpm. 20 segundos.
– 10 ml. de muestra 2.000 rpm. 10 minutos.
4. Descartar el sobrenadante. Llevar el pellet al vortex.
Lisis nuclear y precipitación de proteínas
5. Usando los...
ANDERSON RAMÍREZ AYALA. M.Sc
INTRODUCCIÓN
La biología molecular ha aparecido como una necesidad de explicar, a nivel molecular los fenómenos relacionados con lavida. Algunos de los aportes científicos más relevantes en la aparición de la biología molecular fueron los resultados de los trabajos de Avery y colaboradores, Martha Chase y Watson y Crick, entreotros.
A través de la genética mendeliana se pueden predecir mediante cálculos probabilísticos los valores de riesgo de padecimiento de una patología genética, identificando los genotipos de losindividuos necesarios para el análisis.
El ADN tiene la ventaja de ser idéntico a nivel molecular en cada estructura que se encuentre, sin importar sin son virus (con algunas excepciones), organismosprocarioticos o eucarióticos, lo cual permite la aplicación de una serie de técnicas que logran su identificación a nivel de secuencias específicas que caracterizan especies e incluso individuos.A nivel humano, existe la necesidad de obtener ADN de un amplio espectro de muestras biológicas tales como sangre, hueso, músculo, piel, semen o saliva, etc.
En la sangre se pueden encontrarsecuencias de ADN correspondientes al individuo donador de la muestra o algunos parásitos que suelen encontrarse en el torrente sanguíneo tales como el tripanozoma y la leishmania, entre otras.OBJETIVO
Obtener ADN a partir de una muestra de sangre periférica humana empleando el kit comercial, Wizar Genomic de Promega.
METODOLOGÍA
Lisis de glóbulos rojos
1. Usando los volúmenes dela tabla anterior combine los volúmenes apropiados de solución de lisis celular y sangre. Mezcle por inversión.
2. Incubar por 10 minutos.
3. Centrifugar:
< 300 ul de la muestra 13.000 – 16.0000rpm. 20 segundos.
– 10 ml. de muestra 2.000 rpm. 10 minutos.
4. Descartar el sobrenadante. Llevar el pellet al vortex.
Lisis nuclear y precipitación de proteínas
5. Usando los...
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