electroforesis unicelular en gel

ELECTROFORESIS UNICELULAR EN GEL. (EUG)
En los últimos años ha surgido una técnica sencilla, rápida y sensible utilizada para conocer el daño al DNA, esta es conocida como electroforesisunicelular en gel o en mayormente conocida como ensayo cometa.
Esta técnica ha sufrido varios cambios dependiendo entre otros factores que se evaluará con ella. En este caso puede ser para medir elrompimiento de doble cadena de DNA, daño a las bases nitrogenadas, entrecruzamientos de cadena y fragmentos apoptoticos (Olive, 2002). El mismo laboratorio de Rydberg y Johanson modificaron la técnica inicialpara dar paso a la técnica de electroforesis en microgel en el caso de esta técnica las células eran embebidas en agarosa en gel en portaobjetos de microscopio, lisadas por detergentes y altoscontenidos de sales, posteriormente eran electroforisadas un corto periodo bajo condiciones neutrales, las células que tenían un incremento de daño de DNA incrementaba la migración del daño del núcleo haciael ánodo, la migración era medida tiñendo con bromuro de etidio y midiendo la intensidad de la fluorescencia con un microscopio de fotometría (Singh, 1988).
El ensayo cometa alcalino es la técnicamás utilizada ya que detecta los rompimientos de cadena de DNA y lesiones en los sitios lábiles alcalinos con una mayor sensibilidad (Hartmann, 1997).
El ensayo cometa además de ser favorable paramedir los efectos de la genotoxicidad, también tiene algunos contras como son la medición de la fragmentación del DNA en muestras unicelulares, y la citotoxicidad inducida en el DNA en rompimientos dedoble cadena estas se pueden confundir en las pruebas (Hartmann, 1997). redaccion
El uso de la electroforesis unicelular en gel alcalina es un rápido y sensitivo procedimiento para cuantificar laslesiones del DNA en células mamíferas in vitro e in vivo (Sasaki, 1997). En este caso la detección de daño en el DNA de múltiples órganos es simplificado con el ensayo cometa ya que permite la medición...