Electroforesis



























Introducción
La electroforesis es una técnica de separación de moléculas en una solución por aplicación de un campo eléctrico. En dicho campo, moléculas que posean igual carga eléctrica pero distinto tamaño, se moverán o migrarán a diferentes velocidades. Es decir, las moléculas más livianas se moverán más rápido que otras moléculasmás pesadas. En ésta técnica se utiliza, en general una matriz porosa o gel, ubicada en un recipiente con electrodos y sumergida en una solución conductora. Las mezclas de moléculas son difundidas dentro de la matriz, al aplicar electricidad se generará un campo eléctrico, y las moléculas se moverán a través del gel va a actuar como un tamiz a velocidades variables.
La electroforesis fuedesarrollado primeramente por Tiselius, el cual desarrolló el concepto de frente móvil, ahora electroforesis de zona, y se usó para separar proteínas en solución. Posteriormente se fueron sumando diversas técnicas bajo el mismo fundamento como isoelectroenfoque y la isotacofoesis, basadas en diferentes propiedades físicas. La distinción entre los tres métodos son solo las matrices empleadas encada una, que brindan ventajas comparativas dependiendo de la técnica y de la muestra a separar. A todas estas técnicas que surgieron se le dio el nombre de técnicas convencionales. Posteriormente con el avance científico se regeneró esta técnica, el cual vino a dar un giro completamente a la electroforesis, que fue el empleo de capilares. Este empezó a tener grandes ventajas, ya que ahora, ya nose utilizaba grandes muestras, ahora solo se utilizaba una fracción mínima de muestra, además su estudio era mucho más rápido y preciso, que en las técnicas convencionales que se tardaban mucho tiempo en realizar el análisis. Esta técnica ahora llamada electroforesis capilar permite separar bastante bien biomoléculas, donde la cromatografía liquida se muestra menos eficaz, y compuestos de pequeñamasa molecular.
Hoy en día, el empleo de la electroforesis ha sido muy útil, principalmente en el análisis de muestras biológicas. Es ampliamente usada en análisis de DNA para química forense y en la investigación biológica.
En el siguiente trabajo se desarrollará el concepto de electroforesis, el fundamento de las separaciones electroforéticas así como sus aplicaciones.Electroforesis

1. Historia
La electroforesis es una técnica de separación que emplea un campo eléctrico aplicado que actúa sobre partículas cargadas causando su movimiento a través de una matriz.
Fue empleado por primera vez en el año 1937 pero la importancia de la electroforesis vino a incrementarse cuando en los años cincuenta Arne W. K. Tiselius (bioquímico sueco premio Nobel deQuímica en 1948 por sus trabajos en esta materia) desarrollo el concepto de frente móvil, más tarde impulso la electrolisis de zona, y se usó para separar proteínas en solución.
Entre 1940 y 1960 sobrevino un desarrollo de la electroforesis, aplicándose a diversas moléculas, desde proteínas grandes hasta aminoácidos e iones inorgánicos. A la electroforesis de zona se sumaron además elisoelectroenfoque y la isotacoforesis, basadas en diferentes propiedades físicas. Esto permitió realizar análisis separados en una misma muestra o bien realizar combinaciones de métodos.
La distinción entre los tres métodos también se da a nivel de las matrices empleadas en cada uno, que brindan ventajas comparativas dependiendo de la técnica y de la muestra a separar. Así, se han usado geles depolímeros, papel y capilares.

2. Separaciones electroforéticas
Una separación electroforética se lleva a cabo inyectando una pequeña parte de la muestra en una disolución de tampón que está alojada en un tubo estrecho o en un medio de soporte poroso y plano, como por ejemplo, papel o un gel semisólido. Seguidamente, se aplica un elevado potencial de corriente continua, a través del...