Electroforesis

Análisis cuantitativo y cualitativo del ADN (electroforesis)

Resumen
En la práctica realizamos un análisis cuantitativo del ADN extraído en espinacas,
esperma, bacterias, hongos y plantasmediante electroforesis en un gel de agarosa .
Introducción
La mayoría de los polímeros biológicos poseen carga eléctrica y, por lo tanto, son capaces de
migrar bajo la influencia de un campo eléctrico.El transporte de partículas a través de un
disolvente mediante un campo eléctrico recibe el nombre de electroforesis.
La electroforesis es una técnica habitual en el laboratorio clínico. Permite separar especies
químicas (ácidos nucleicos o proteínas) a lo largo de un campo eléctrico en función de su
tamaño y de su carga eléctrica. Los ácidos nucleicos, ADN y ARN, tienen por naturaleza carganegativa. Si ponemos fragmentos del ADN extraído de una m uestra biológica sobre un soporte
poroso (gel) y aplicamos un campo eléctrico, se producirá la migración diferencial de los
fragmentos através de los poros de la matriz. La tinción del gel con bromuro de etidio, que es
una sustancia fluorescente que se intercala en la molécula de ADN, y la exposición con luz
ultravioleta, permiteobservar el resultado de ésta migración. El tamaño de los fragmentos de
ADN se puede estimar comparándolos con el patrón de bandas que se obtiene de marcadores
comerciales de peso molecular conocido. Laelectroforesis de ADN es útil para comparar
patrones de bandas de diferentes muestras biológicas. Así por ejemplo se puede usar para
comparar muestras de individuo sano frente a individuo enfermo,para la identificación de
ácidos nucleicos de agentes infecciosos o para la obtención de un fragmento determinado de
ADN que, una vez localizado en el gel, puede ser extraído para análisisposteriores.
La resolución y velocidad de separación de fragmentos de ADN por electroforesis son
reguladas a través de la concentración de agarosa (o acrilamida) en el gel y el voltaje aplicado
durante la...