electroforesis
Páginas: 3 (641 palabras)
Publicado: 14 de noviembre de 2013
11. Electroforesis en papel
1. Se adaptan convenientemente a la cámara de electroforesis las tiras impregnadas con la solución amortiguadora.
2. Se aplica la muestra. Se depositan de 10–15 µlen una fina banda en la zona del cátodo paralela a los polos de la cubeta electroforética, para separar proteínas del suero o de cualquier líquido biológico (orina, líquido cefalorraquídeo, etc…).3. Se separan las diferentes fracciones mediante el paso de la corriente. La duración depende de la intensidad y el voltaje suministrado. Se aplican 0,26 mA por cm de ancho de la tira.
4. Acabadala separación, la tira se retira y seca en la estufa entre 60–110ºC.
5. Se colorea sumergiendo la tira en la solución colorante durante 5 min. El tiempo de coloración varía según el coloranteempleado, oscilando entre 5–30 min.
6. Se lava 3 veces con una solución de acético al 5%.
7. Se seca a temperatura ambiente.
8. Se decolora, retirando el exceso de colorante. Se deja sólo el que hasido fijado por las proteínas.
9. Se valora por fotodensitometría. Consiste en hacer pasar la tira por un haz de luz que es absorbida según la cantidad de proteína coloreada.
12.Electroforesis en gel de poliacrilamida.
Los geles de poliacrilamida se forman por polimerización de la acrilamida por acción de un agente entrecuzador, es químicamente inerte, de propiedades uniformes,capaz de ser preparado de forma rápida y reproducible. Forma, además, geles transparentes con estabilidad mecánica, insolubles en agua, relativamente no iónicos y que permiten buena visualización delas bandas durante un tiempo prolongado. Además tiene la ventaja de que variando la concentración de polímeros, se puede modificar de manera controlada en el tamaño del poro, lamentablemente cada vezse emplea menos en diagnostico debido a su neurotoxocidad.
1.3 determinación de triglicéridos
Para la determinación de triglicéridos en suero se utilizan reactivos comerciales (Kit comercial de...
1. Se adaptan convenientemente a la cámara de electroforesis las tiras impregnadas con la solución amortiguadora.
2. Se aplica la muestra. Se depositan de 10–15 µlen una fina banda en la zona del cátodo paralela a los polos de la cubeta electroforética, para separar proteínas del suero o de cualquier líquido biológico (orina, líquido cefalorraquídeo, etc…).3. Se separan las diferentes fracciones mediante el paso de la corriente. La duración depende de la intensidad y el voltaje suministrado. Se aplican 0,26 mA por cm de ancho de la tira.
4. Acabadala separación, la tira se retira y seca en la estufa entre 60–110ºC.
5. Se colorea sumergiendo la tira en la solución colorante durante 5 min. El tiempo de coloración varía según el coloranteempleado, oscilando entre 5–30 min.
6. Se lava 3 veces con una solución de acético al 5%.
7. Se seca a temperatura ambiente.
8. Se decolora, retirando el exceso de colorante. Se deja sólo el que hasido fijado por las proteínas.
9. Se valora por fotodensitometría. Consiste en hacer pasar la tira por un haz de luz que es absorbida según la cantidad de proteína coloreada.
12.Electroforesis en gel de poliacrilamida.
Los geles de poliacrilamida se forman por polimerización de la acrilamida por acción de un agente entrecuzador, es químicamente inerte, de propiedades uniformes,capaz de ser preparado de forma rápida y reproducible. Forma, además, geles transparentes con estabilidad mecánica, insolubles en agua, relativamente no iónicos y que permiten buena visualización delas bandas durante un tiempo prolongado. Además tiene la ventaja de que variando la concentración de polímeros, se puede modificar de manera controlada en el tamaño del poro, lamentablemente cada vezse emplea menos en diagnostico debido a su neurotoxocidad.
1.3 determinación de triglicéridos
Para la determinación de triglicéridos en suero se utilizan reactivos comerciales (Kit comercial de...
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