Electroforesis

ELECTROFORESIS

La electroforesis en gel es una técnica sencilla empleada de forma rutinaria en laboratorio para separar moléculas biológicas especialmente ADN, ARN y proteínas. La electroforesis también es una técnica habitual en el laboratorio clínico.
Permite separar especies químicas (ácidos nucleicos o proteínas) a lo largo de un campo eléctrico en función de su tamaño y de su cargaeléctrica. Los ácidos nucleicos, ADN y ARN, tienen por naturaleza carga negativa.
Si ponemos fragmentos del ADN extraído de una muestra biológica sobre un soporte poroso (gel de agarosa) y aplicamos un campo eléctrico, se producirá la migración diferencial de los fragmentos a través de los poros de la matriz.
La tinción del gel con bromuro de etidio, que es una sustancia fluorescente que seintercala en la molécula de ADN, y la exposición con luz ultravioleta, permite observar el resultado de ésta migración. En nuestro caso se utilizará un método de tinción NO TOXICO.
El tamaño de los fragmentos de ADN se puede estimar comparándolos con el patrón de bandas que se obtiene de marcadores comerciales de peso molecular conocido. La electroforesis de ADN es útil para comparar patrones de bandasde diferentes muestras biológicas. Así por ejemplo se puede usar para comparar muestras de individuo sano frente a individuo enfermo, para la identificación de ácidos nucleicos de agentes infecciosos o para la obtención de un fragmento determinado de ADN que, una vez localizado en el gel, puede ser extraído para análisis posteriores.
 
  | 1. Electroforesis en gel de agarosa. Principios ypráctica BASICAPráctica sencilla para demostrar la separación de moléculas mediante el uso de la electroforesis en gel de agarosa. Se utilizan colorantes seguros que simulan fragmentos de ADN.REF. ELECTBASICA (4 prácticas: 95 €)Descargar guia didáctica y protocolo completo |
|   2. Electroforesis en gel de agarosa. Principios y práctica AVANZADA. Práctica sencilla para demostrar la separación defragmentos de ADN (marcadores de peso molecular y ADN genómico) mediante el uso de la electroforesis en gel de agarosa y posterior tinción del gel utilizando métodos NO TOXICOS. REF. ELECTAVANZADA (4 prácticas: 135 €)Descargar guia didáctica y protocolo completo   |
Para la realización de estas prácticas es NECESARIO disponer de un Kit básico de electroforesis que consta de lo siguiente: Cubeta deelectroforesis, fuente de alimentación, micropipeta y puntas. REF. ELECTROFORESIS (425 €)Por la compra de un Kit Básico de Electroforesis se suministra un kit completo para realizar 5 prácticas + 1 transiluminador (área iluminada que permite una mejor visualización de los geles de agarosa)   |
 KIT Básico de Electroforesis |   |   Transiluminador | Sistema de documentación |

1.3.6.ELECTROFORESIS
         La electroforesis es un método de laboratorio en el que se utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoleculas según su tamaño y carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa.
         Fue empleado por primera vez por  en el año 1937, pero su importancia vino a incrementarse cuando en los años cincuenta E. L.Durrum y Arne W.K. Tiselius ,impulsaron la electroforesis de zona, nombre que se asigno a la separación de materiales en un campo eléctrico en presencia de algún tipo de soporte; aunque este termino se limito originalmente al análisis de coloides y partículas submicroscopicas , se ha convertido en estos últimos años en una metodología aplicada a sustancias de bajo peso molecular.
1. Fundamento.
       Cuando una mezcla demoléculas ionizadas y con carga neta son colocadas  en un campo eléctrico, estas experimentan una fuerza de atracción hacia el polo que posee carga opuesta, dejando transcurrir  cierto tiempo las moléculas cargadas positivamente se desplazaran hacia el cátodo (el polo negativo) y aquellas cargadas positivamente se desplazaran hacia el ánodo (el polo positivo).
        El movimiento de las...