electroforesis

Origen de la electroforesis
Electroforesis
La electroforesis es la separación de partículas cargadas bajo la influencia de un campo eléctrico. Un físico Ruso Alexander Reuss hizo las primeras observaciones del principio de la electroforesis en 1807. En la aplicación del campo eléctrico a una suspensión de arcilla en agua, el observó que las partículas de arcilla se movían hacia el polopositivo. Las observaciones de que las partículas con carga positiva se movían hacia el polo negativo y las partículas con carga negativa se movían hacia el polo positivo fueron confirmadas por Michael Faraday en Inglaterra y E.H. Bosi-Raymond en Alemania. También se observó que la mayoría de las partículas son ubicadas con cargas son más rápidas en su movimiento y que el número de cargas en exceso  enlas partículas y el voltaje de la corriente aplicada también afecta la velocidad de su movimiento. Adicionando un ácido, base, sal o un electrolito a la solución se supera la dificulta de aumentar la conductividad eléctrica de la solución.  

Electroforesis en gel

La electroforesis en gel es un método que separa (basado en  el tamaño, carga eléctrica y otras propiedadesfísicas)  macromoléculas tales como ácidos nucleídos y proteínas. El término electroforesis es usado para describir la migración de una partícula cargada bajo la influencia de un campo eléctrico. Por tanto a lo que se refiere la electroforesis en gel es la técnica en la cual las moléculas son forzadas a través del gel ubicado en un espacio entre dos límites (extremos), motivado por una corriente eléctrica. En cada unode los extremos del gel hay electrodos activados que suministran la fuerza de atracción. Por tanto unas propiedades de la molécula especialmente la posesión de grupo ionizables, determina como rápidamente un campo eléctrico puede mover la molécula a través de un medio gelatinoso. 

Una aplicación muy importante para la electroforesis en gel es en la tecnología del ADN.
La electroforesis en geles una de las más importantes herramientas en biología molecular y es de valor crítico en muchos aspectos de la manipulación y estudio genético. Un uso es la identificación de moléculas ADN particulares por los patrones de banda que ellos producen en la electroforesis en gel después se der cortado con varias enzimas de restricción. ADN viral, plasmídico y segmentos particulares de ADN cromosomalpuede ser identificados por esta técnica. Otro uso es la separación y purificación de fragmentos individuales conteniendo genes interesantes, los cuales pueden ser recuperados del gel con actividad biológica completa.

La electroforesis en gel hace posible determinar la diferencia genética y la relación evolutiva entre especies y plantas y animales. Usando esta tecnología es posible separara eidentificar las proteínas que difieren en por lo menos en un solo aminoácido.

Principios físicos de la electroforesis en gel de agarosa
La electroforesis en gel es una técnica que se emplea para separar los ácidos nucleicos y las proteínas. La separación de las macromoléculas depende de dos variables: carga y masa. Cuando una muestra biológica, como por ejemplo el ADN, se mezcla en unasolución tampón y se aplica a un gel, esas dos variables actúan conjuntamente. La corriente eléctrica de un electrodo repele las moléculas, al tiempo que el otro electrodo las atrae. La fuerza de fricción del material de gel actúa como «tamiz molecular», separando las moléculas en función de su tamaño.
Durante la electroforesis, las macromoléculas son empujadas a través de los poros, dependiendo sutasa de migración por el campo eléctrico de los siguientes factores:
• Fuerza del campo
• Tamaño y forma de las moléculas
• Hidrofobicidad relativa de las muestras
• Fuerza iónica y temperatura del tampón en que se desplazan las moléculas.
Para tener una idea cabal del proceso de separación de las partículas cargadas en la electroforesis en gel, conviene tener presentes las simples...