Electroforesis

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE
HONDURAS
LABORATORIO DE GENÉTICA MÉDICA BI- 134
PRÁCTICA No. 2. ELECTROFORESIS DE ÁCIDOS
NUCLEICOS EN GELES DE AGAROSA
OBJETIVOS:
• Describir el fundamento de latécnica de electroforesis de
ADN en gel de agarosa.
• Identificar un método de electroforesis en gel para la
separación y purificación de moléculas de ADN.
• Calcular el peso molecular de un ADN presenteen una
preparación, comparándolo con marcadores de tamaño
conocido.

Ciudad Universitaria,

Febrero

I. INTRODUCCIÓN
La electroforesis es una de las técnicas utilizadas
en laboratorio que nospermite la separación y
cuantificación de moléculas de acuerdo a su
movilidad en un campo eléctrico.
Moléculas como aminoácidos, péptidos, proteínas
y ácidos nucleicos poseen grupos ionizables y
puedehacerse que existan en disolución en forma
de especies con carga eléctrica, cationes (+) o
aniones (-). Los cationes se trasladan hacia el
cátodo (-) y los aniones hacia el ánodo (+)
En el caso de losácidos nucleicos debido a su
carga negativa se mueven hacia el ánodo a través
del gel al aplicarse a este una diferencia de
potencial eléctrico.

FACTORES QUE AFECTAN LA
VELOCIDAD DE MIGRACIÓN
•Muestra: a) carga b) tamaño c) forma
• Campo eléctrico: a) intensidad b) voltaje
c) resistencia
• Tampón: a) composición b) concentración
c) pH
• Medio de soporte: a) absorción
b)electroósmosis c)tamizado molecular
• Tipo de soporte: a) papel b) agar

PRECAUCIONES
• Evitar el contacto directo con el foco
emisor de luz ultravioleta.
• Utilizar guantes cuando se manipule el
gel ya que este contieneBromuro de
etidio el cual es un potente cancerígeno.

Electroforesis en Gel de Poliacrilamida (SDS- PAGE)
Los geles de poliacrilamida constituyen un
excelente
medio
de
soporte
para
separacioneselectroforéticas de proteínas,
dado que reúnen una serie de propiedades
idóneas:
transparencia,
elasticidad,
porosidad controlable y compatibilidad con
una gran variedad de compuestos químicos.
La...