ELECTROFORESIS

ELECTROFORESIS 
 
INTRODUCCIÓN:​
 fran 
  

La electroforesis  es un método de laboratorio en el que se utiliza una corriente eléctrica 
controlada con  la  finalidad de  separar biomoleculas  según su  tamaño y carga eléctrica 
a través de una matriz gelatinosa. 
Fue  empleado  por  primera  vez  por  en  el  año  1937,  pero  su  importancia  vino  a 
incrementarse  cuando  en  los  años cincuenta  E.  L.Durrum  y  Arne  W.K.  Tiselius  , 
impulsaron  la  electroforesis  de  zona,  nombre  que  se  asignó  a  la  separación  de 
materiales  en  un  campo  eléctrico  en  presencia  de  algún  tipo de soporte; aunque este 
término  se  limitó  originalmente  al  análisis  de  coloides  y  partículas  submicroscópicas  , 
se  ha  convertido   en  estos  últimos  años  en  una metodología  aplicada  a  sustancias de 
bajo peso molecular. 
El  término  de  electroforesis  proviene  de  dos  palabras  griegas,  elektro  que   significa 
electricidad y phoros que significa movimiento. 
 
 
¿POR QUÉ SE SEPARAN LAS PROTEÍNAS? ​
nacho 
 
Las proteínas  pueden  tener carga neta positiva  o  negativa, los  ácidos  nucleicos  tienen 
carga  negativa   debido  a  sus  grupos  fosfato,  de forma  que  la carga del  ácido  nucleico 
está condicionada por el número de grupos fosfato. 
Cuando  el   pH  es  bajo,  los  grupos  ionizables  están  protonados,  y  la  carga  neta  de  la 
proteína  es  de  signo  positivo.  Cuando  el  pH  es  alto,  los  grupos  ionizables  están 
desprotonados,  y  la carga neta es de signo negativo. Entre ambas zonas, habrá un pH 
en  el  cual  la  carga neta  de  la  proteína  es  nula.  Es  el  pH  isoeléctrico  o  punto 
isoeléctrico, y es característico de cada proteína (Tabla de la izquierda). 
A valores  de  pH  por debajo del  pH  isoeléctrico  la  carga  neta de la proteína es positiva, 
y  a  valores  de  pH  por  encima  del  pH  isoeléctrico,  la  carga  neta  de  la  proteína  es 
negativa.  La  mayoría  de  las  proteínas intracelulares  tienen  carga  negativa,  ya  que su 
pH  isoeléctrico  es  menor  que  el  pH  fisiológico  (que  está  próximo  a  7).  Se  llaman 
proteínas  ácidas  a aquellas  que  tienen un punto isoeléctrico bajo (como  la pepsina), y 
proteínas básicas a las que tienen un punto isoeléctrico alto (como las histonas). 
 
 
 
 
 

FUNDAMENTO:​
 carreño 
 
Cuando  una  mezcla  de  moléculas  ionizadas y  con  carga  neta  son  colocadas  en  un 
campo  eléctrico,  estas  experimentan  una  fuerza  de  atracción  hacia  el polo  que posee 
carga  opuesta,  dejando  transcurrir  cierto tiempo  las moléculas cargadas positivamente 
se desplazaran  hacia  el cátodo (el polo negativo) y aquellas cargadas positivamente se 
desplazaran hacia el ánodo (el polo positivo). 
 
El  movimiento  de  las moléculas  esta  gobernado  también  por  dos fuerzas  adicionales; 
inicialmente  la  fricción  entre  el soluto  (mezcla) y  solvente  dificultará  este movimiento 
originando una  fuerza que se  opone  ,  por otro  lado  las moléculas tienen que moverse 
en  forma  aleatoria  o  movimiento  browniano  (​
movimiento  aleatorio  que  se  observa  en 
algunas   partículas  microscópicas  que  se hallan  en  un  medio  fluido ) debido a  que  poseen 
energía  cinética   propia  denominado  difusión.  La  energía  cinética  de  las  moléculas 
aumenta con la temperatura, por ello a mayor temperatura mayor difusión. 
 
 

La  suma de todas estas  fuerzas provoca  que  las moléculas no  migren  de  una manera 
homogénea,  de  tal  manera  que,  si  las  moléculas  son colocadas en un cierto lugar  de 
solución, los iones comenzaran a moverse formando un frente cuya anchura aumentara 
con el tiempo. 
 Para reducir la anchura de este frente podemos reducir el movimiento de las moléculas 
empleando  un  medio  que  oponga  mas  resistencia  a  dicho  movimiento.  Una  forma 
común  de  hacer  esto  es  formar  un  gel. El  gel  consiste  de un polímero soluble de  muy 
alto  peso ...