ELECTROFORESIS

UNIVERSIDAD LATINA DE PANAMA
SEDE DAVID
FACULTAD DE CIENCIAS MEDICAS Y DE LA
SALUD
LICENCIATURA EN TECNOLOGIA MEDICA
LABORATORIO DE BIOLOGIA MOLECULAR
Y CELULAR
ELECTROFORESIS

PROF. CARLOS A YUNSAN

ELECTROFORESIS
El
término
de
electroforesis
proviene de dos palabras griegas,
elektro que significa electricidad y
phoros que significa movimiento.
Se trata de una técnica de
separación departículas basada
en la velocidad diferencial de
migración que se observa en las
partículas cargas, neutras o
pasivas dispuestas en un medio
acuoso, debido a la atracción
y/o repulsión que sufren en un
campo eléctrico

Arne Wilhelm Kaurin
Tiselius, considerado
el
padre
de
la
electroforesis

ELECTROFORESIS
1950. La electroforesis de zona que utilizaban
papel de filtro como soporte. El principal valedor
dela técnica fue H. Svenson, díscipulo de Tiselius,
pero sin embargo, la técnica tuvo un corto recorrido,
ya que al igual que la de su predecesor, este avance
de la electroforesis presentaba también grandes
limitaciones (escasa resolución o evaporación de
electrolito)

ELECTROFORESIS
• 1959.
La
electroforesis
en
gel
de
poliacrilamida,
siendo
los
principales
valedores
de
esta
técnica
Raymond,Weintraub, Davis y Ornstein, aunque no
debemos olvidar el trabajo realizado por Stellan
Hjertén en la sombra.
• 1964. La electroforesis discontinua (usando
tampones con valores de pH diferentes e iones de
distinta movilidad para favorecer la concentración
de las bandas y facilitar la separación posterior)
por parte de Ornestein y Davis

ELECTROFORESIS
• 1967.
La
electroforesis
SDS-PAGE
oelectroforesis en gel de poliacrilamida en
dodecil-sulfato sódico, siendo los valedores
Shapiro, Viñuela y Maizel. Con esta técnica se
puede
determinar
en
condiciones
desnaturalizantes (inactivan la proteína) el
tamaño molecular de las proteínas y determinar
su grado de pureza. Es de las más habituales en
el trabajo de rutina del laboratorio.

ELECTROFORESIS
• 1970. El iso electroenfoque, técnica deelectroforesis basada en el principio del
punto isoeléctrico de las proteínas. Iniciado
por Tiselius en 1947 en sus estudios sobre la
naturaleza de las proteínas del suero, sería
finalmente
demostrada
por
Svensson,
científico también del Instituto Karolinska

ELECTROFORESIS
La electroforesis es un método de laboratorio en el que
se utiliza una corriente eléctrica controlada con la
finalidad de separarbiomoleculas según su tamaño y
carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa.
Fue empleado por primera vez por en el año 1937, pero su
importancia vino a incrementarse cuando en los años
cincuenta E. L.Durrum y Arne W.K. Tiselius , impulsaron la
electroforesis de zona, nombre que se asigno a la
separación de materiales en un campo eléctrico en
presencia de algún tipo de soporte; aunque estetermino
se limito originalmente al análisis de coloides y partículas sub
microscópicas , se ha convertido en estos últimos años en una
metodología aplicada a sustancias de bajo peso molecular

ELECTROFORESIS
Cuando una mezcla de moléculas ionizadas y con
carga neta son colocadas en un campo eléctrico,
estas experimentan una fuerza de atracción hacia
el polo que posee carga opuesta, dejandotranscurrir cierto tiempo las moléculas cargadas
positivamente se desplazaran hacia el cátodo (el
polo negativo) y aquellas cargadas positivamente
se desplazaran hacia el ánodo (el polo positivo).

ELEC TROFORESIS
Inicialmente la fricción con el solvente dificultará
este movimiento originando una fuerza que se
opone , por otro lado las moléculas tienen que
moverse en forma aleatoria o movimiento
brownianodebido a que poseen energía cinética
propia denominado difusión. La energía cinética
de las moléculas aumenta con la temperatura,
por ello a mayor temperatura mayor difusión.

Métodos electroforéticos
zonales
Son los más comunes, dada su alta aplicabilidad en
diferentes campos. Son útiles para lograr la
separación de mezclas complejas. Se aplican
pequeñas cantidades de la disolución de...