Electroforesis

Gerardo Jiménez Muñiz Elena Jorge de Castro Maite Ledo Varela Juana Marín Gómez Estrella Maroto Quintana Laura Mª Primoy Rodríguez Ricardo Sánchez Sánchez

ÍNDICE

1. Introducción 2. Cromatografía de fase enlazada 3. Cromatografía de cambio iónico 4. Cromatografía de par iónico 5. Cromatografía de exclusión 6. Cromatografía en fluidos supercríticos 7. Fundamentos de electroforesis 8.Electroforesis capilar 9. Bibliografía

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INTRODUCCIÓN

La separación de compuestos con el propósito de identificar, cuantificar o purificar es uno de los aspectos desafiantes de la química analítica. En este trabajo se consideran algunos tipos de cromatografía, los cuales se encuentran entre los más poderosos métodos deseparación. Así, la cromatografía se puede definir como el método y la técnica usada para separar y analizar mezclas de sustancias químicas, basados en la diferente absorción o adsorción de éstas por otros compuestos y disolventes. Normalmente se emplean columnas cargadas con adsorbentes sólidos y pulverizados en las que la fase móvil es un líquido o un gas y la fase estacionaria es comúnmente unlíquido que recubre la superficie de partículas sólidas. A veces las partículas sólidas mismas pueden servir como fase estacionaria. En cualquier caso, el reparto de solutos entre las fases móvil y estacionaria es la causa de la separación de solutos. Así el soluto que tenga mayor afinidad por la fase estacionaria se moverá con mayor lentitud a lo largo de la columna. En la práctica, la cromatografía sedivide en varias clases: 1. Cromatografía de adsorción: en la que se utiliza una fase estacionaria sólida y una fase móvil líquida o gaseosa. El soluto puede adsorberse en la superficie de las partículas sólidas. El equilibrio entre el estado adsorbido y la solución es la causa de la separación de las moléculas de soluto. 2. Cromatografía de reparto: en esta técnica, una fase estacionaria formauna película delgada en la superficie del soporte sólido. El soluto se equilibra entre este líquido estacionario y una fase móvil líquida o gaseosa. 3. Cromatografía de intercambio iónico: en este tipo de cromatografía aniones y cationes se unen covalentemente a la fase estacionaria sólida, por lo común una resina. Los iones de soluto, de carga opuesta a los de la fase estacionaria, son atraídospor esta última mediante una fuerza electrostática. La fase móvil es un líquido. 4. Cromatografía de exclusión molecular: en la que la fase móvil líquida o gaseosa pasa a través de un gel poroso. Los poros son suficientemente pequeños para excluir las moléculas grandes de soluto, pero no las pequeñas. Así, la corriente de moléculas grandes pasa sin penetrar en el gel y las pequeñas requieren mástiempo para pasar a través de la columna porque entran en el gel.
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5. Cromatografía por afinidad: se utilizan interacciones altamente específicas entre un tipo de moléculas de soluto y otras moléculas que se unen (inmovilizan) covalentemente a la fase estacionaria.

También se hablará en este trabajo de otra técnica, utilizada en esta caso para la separación de proteínas, denominadaelectroforesis, prestando una atención especial a la electroforesis capilar, sus métodos y sus aplicaciones.

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CROMATOGRAFÍA DE FASE ENLAZADA

También se la conoce con el nombre de “cromatografía unida químicamente”. Junto con la cromatografía líquido-líquido forman lo que se conoce con el nombre de “cromatografía de reparto”. La diferencia entre estas técnicas radica en las formas en que seretiene la fase estacionaria sobre las partículas soporte del relleno; en este caso, la fase estacionaria se une químicamente a la superficie del soporte. En la actualidad, los métodos de fase unida químicamente son los que predominan debido a las desventajas de los sistemas líquido-líquido, siendo la más importante la pérdida de fase estacionaria por disolución en la fase móvil, lo que hace...