ELISA

En ELISA, son importantes los siguientes pasos: centrifugar la muestra para aislar el suero sanguíneo (aumenta la especificidad); cubrir con cuidado cada fondo de pocillo con antígeno (la adiciónjusta equilibra tanto sensibilidad como especificidad); respetar los tiempos y temperaturas de reacción (aumenta la sensibilidad); pasos intermedios de lavado (aumenta la especificidad). Enidentificación bacteriana: amplificación por PCR (aumenta la sensibilidad) y purificación del producto (aumenta tanto sensibilidad como especificidad).

- Laboratorio de inmunología:
1) Centrifugar la muestrapara aislar el suero sanguíneo: si quedara presente alguna célula, puede dar lugar a un falso positivo, afectando así a la especificidad (haría que la prueba fuera poco específica; si aislamos elsuero, la muestra es más específica).
2) Cubrir (“bañar”) con cuidado cada fondo de pocillo de la placa con antígeno: si ponemos poco antígeno, la prueba puede dar un falso positivo (poco específica); siponemos mucho, puede dar un falso negativo (poca sensibilidad). La adición justa de antígeno equilibra tanto la sensibilidad como la especificidad.
[•Elaboración de los controles: sin controles dereferencia, no podemos confiar en el resultado de la prueba (sería para la precisión)]
3) Tiempos y temperaturas de incubación (reacción): si no se llevan a cabo adecuadamente, puede salir un falsonegativo. Hacerlo correctamente aumenta la sensibilidad.
4) Pasos intermedios de lavado: permite retirar el anticuerpo (primario o secundario) que no ha reaccionado (bien específicamente con elantígeno o bien con el primer anticuerpo). Si no lo quitamos, puede reaccionar con el sustrato que añadimos en el siguiente paso y dar un falso positivo. Aumenta la especificidad.
- Laboratorioidentificación bacteriana:
1) Amplificación por PCR: la necesitamos para aumentar la sensibilidad de la muestra. Si el sujeto está infectado con la bacteria, y no amplificamos la secuencia diana de ésta, que...