Elnegro

Código
Versión
Fecha

GUÍA DE TRABAJO
Ingeniería Biomédica

FDE 048
03
2009-06-09

1. IDENTIFICACIÓN
Nombre Guía: Determinación de la Concentración de Glucosa en Plasma Fisiológico
Mediante el Método Glucosa oxidasa/Peroxidasa.
Asignatura
Área
Código

Bioquímica Médica II
Ciencias Básicas de la
Ingeniería
BMO42

Correquisito(s)

Guía No.
Nivel

Créditos

2
TPS
4TIS
TRABAJO INDEPENDIENTE
Trabajo
Trabajo
Teórico
Práctico

4

Pensum

AYO42

Prerrequisito(s)
2

TPT

10

2
CDO24
BMO32

64 TIT
TRABAJO PRESENCIAL
Trabajo
Trabajo
Teórico
Práctico

32
X

2. IDENTIFICACIÓN
COMPETENCIAS

CONTENIDO TEMÁTICO
1. Enzimas


Catálisis:
aspectos
cinéticos
y
termodinámicos de las
reacciones
Entender
las
reacciones
deenzimáticas y las variables  Nomenclatura
clasificación
que afectan su cinética
 Mecanismo de acción
de las enzimas
 Cinética enzimática
 Cinética de la inhibición
enzimática
 Mecanismos
de
regulación enzimática
2. Metabolismo
de
Entender como la célula
carbohidratos
obtiene, almacena y utiliza la
3. Glucólisis
y
energía
fermentación

INDICADOR DE LOGRO
Explica el mecanismo deacción de las enzimas
Identifica a las enzimas
como proteínas y a partir
de
allí
describe
su
comportamiento
Identifica las condiciones
bajo
las cuales, las
enzimas
disminuyen o
pierden su
actividad
biológica.
Entender como la célula
obtiene, almacena y utiliza
la energía

GUÍA DE TRABAJO
Ingeniería Biomédica

Código
Versión
Fecha

FDE 048
03
2009-06-09

3.RECURSOS REQUERIDOS
Instalaciones
-

Laboratorio de Ciencias Biomédicas H-105

Equipos
–

Espectrofotómetro para lectura de absorbancias de 500 ± 20 nm

–

Baño de agua a 37ºC

–

Centrifuga estándar

Herramientas
–

*Bata y guantes (Estudiantes)

–

Micropipeta de Volumen Variable 0,5 ul – 10 ul

–

Micropipeta de Volumen Variable 100 ul – 1000 ul

–

Pipetas Pasteur–

*Vacutainer con anticoagulante EDTA (Estudiantes)

–

Jeringa y camisilla (Estudiantes)

–

Alcohol antiséptico

–

Algodón

–

1 Tubos eppendorf de 2.5 ml

–

3 Celdas cuadradas de 10 mm

Materiales
–

5 µL de Suero o plasma fisiológico
Colectar preferiblemente después de un periodo de ayuno durante la noche. La
glucosa es suero es estable hasta 5 días Conservarde 2-8ºC.

–

1500 µL de Agente Reactivo
Fosfatos 100 mmol/L, fenol 5 mmol/L, glucosa oxidasa > 10 µ/mL, peroxidasa > 1
µ/mL, 4-aminoantipirina 0,4 mmol/L, pH 7,5).
Si esta solución presenta partículas, turbidez y una absorbancia del
blanco superior a 0,150 a 500 nm (cubeta de 1 cm), se encuentra en
estado de deterioro. Conservar de 2-8ºC.

– 5 µL de Solución Patrón deGlucosa/Urea/Creatinina

Código
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Fecha

GUÍA DE TRABAJO
Ingeniería Biomédica

FDE 048
03
2009-06-09

Glucosa 100 mg/dl (5,55 mmol/L), urea 50 mg/dL, creatinina 2 mg/dL. Patrón
primario acuoso.
Si esta solución presenta partículas o turbidez, está en estado de
deterioro. Conservar de 2-8ºC.

4. PROCEDIMIENTO
4.1.

Fundamento del Método

La glucosa es la principal fuente de energía delorganismo. La insulina, producida en las
células de los islotes del páncreas, facilita la entrada de glucosa en las células de los
tejidos. Una deficiencia de insulina o una disminución de su actividad ocasionan un
aumento de la glucosa en sangre.
Se encuentran concentraciones elevadas de glucosa en suero o plasma en pacientes con
diabetes mellitus (dependiente de insulina o no dependiente deinsulina) y con otras
condiciones o síndromes2, 3.
La hipoglucemia puede darse como respuesta al ayuno, o bien puede ser debida a
fármacos, venenos, errores congénitos del metabolismo o gastrectomía previa 1, 3.
El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único
ensayo, sino que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio.
La glucosa presente en...