endosporas

LABORATORIO Nº 7
AISLAMIENTO DE BACTERIAS DEL GENERO BACILLUSY COLORACION DE LAS ESPORAS BACTERIANAS
RESUMEN:
Las esporas son estructuras densas en las que se transforman las bacterias para resistir el calor o la desecación, y son muy resistentes a la acción de desinfectantes. Cuando las condiciones vuelven a ser favorables, las esporas germinan y dan lugar de nuevo a la bacteria en formavegetativa. En esta práctica adquiriremos destreza en la técnica de coloración ya que esta técnica es muy importante para la identificación de bacterias puesto que nos enseña a diferenciar las bacterias e identificar y separar las esporuladas de las no esporuladas.
PALABRAS CLAVES: endoesporas, dilución, frotis,
INTRODUCCIÓN.
Los microorganismos detectan y se adaptan a los cambios en suambiente. Cuando se agotan los alimentos favorecidos, algunas bacterias pueden llegar a ser motile para buscar alimentos, o pueden producir enzimas para explotar recursos alternativos. Un ejemplo de una estrategia extrema de la supervivencia empleada por ciertas bacterias que son Gram positivas y de bajo contenido de G+C es la formación de endosporas. Este proceso de desarrollo complejo se inicia amenudo en respuesta a la privación de nutrientes. Esto permite que la bacteria produzca una célula inactiva y altamente resistente para preservar el material genético de la célula en tiempos de estrés extremo.
Las endosporas pueden sobrevivir asaltos ambientales que matarían normalmente a las bacterias. Estos estreses incluyen temperatura alta, la alta irradiación UV, la desecación, el daño químico yla destrucción enzimática. Las características extraordinarias de la resistencia de endosporas los hacen de importancia particular porque no son matadas fácilmente por muchos tratamientos antimicrobianos. Una variedad de diversos microorganismos forma las "esporas" o los "quistes", pero loa endosporas de bacterias Gram-positivo y de bajo contenido de G+C son en gran medida los más resistentes alas condiciones ásperas.
La resistencia de una endospora se puede explicar en parte por su estructura celular particular. La capa proteica externa que rodea la espora proporciona mucha de la resistencia química y enzimática. Debajo de la capa reside una capa muy gruesa de peptidoglicano especializada llamada la corteza. La formación apropiada de la corteza es necesaria para la deshidratación de labase de la espora, que ayuda en resistencia contra temperaturas altas. La pared celular de germen reside debajo de la corteza. Esta capa de peptidoglicano será convertida en la pared de célula de la bacteria después de que la endospora germine. La membrana interna, debajo de la pared de célula de germen, es una barrera importante de permeabilidad contra varios productos químicos potencialmenteperjudiciales. El centro de la endospora, la corteza, existe en un estado muy deshidratado y contiene la ADN de la célula, las ribosomas y las cantidades grandes de ácido dipicolinico. 
MATERIALES Y METODOS: los materiales y reactivos utilizados en la práctica fueron los siguientes: Probeta de 100 ml, Beaker de 100ml, Plancha de calentamiento, Portaobjetos, Mecheros, Pinzas para tubos de ensayo,Pinzas para tubos de ensayo, Frasco lavador con agua destilada, Cultivos de Bacillus cereus y Bacillus subtilis, Verde de malaquita (solución acuosa al 5%), Tinta china, Solución salina isotónica, Fenol al 2%, Aceite de inmersión, Safranina (solución acuosa al 0.5%), Baño de María y Microscopio compuesto
El método utilizado fue:
1. AISLAMIENTO DE BACTERIAS EPORULADAS DEL GENERO BACILLUS
Muestrasde estiércol de animales domesticos (vaca)
Se suspenden 10g de la muestra desecada en 10ml de agua destilada.
La suspensión es pasteurizada durante 20 minutos a 80ºC (para eliminar los microorganismos no formadores de esporas).
La suspensión se diluye seriadamente con solución salina
Se siembran alícuotas de 0.1ml en cajas de Petri con agar nutritivo enriquecido con extracto de levadura al...