Ensallo Del Dengue

Rev Peru Med Exp Salud Publica 22(3), 2005

Etiología del síndrome febril

TRABAJOS ORIGINALES

TIPIFICACIÓN MOLECULAR DEL VIRUS DENGUE 3 DURANTE EL
BROTE EPIDÉMICO DE DENGUE CLÁSICO EN LIMA, PERÚ, 2005
Enrique Mamani Z1, María García M1, Victoria Gutiérrez P1, César Cabezas S1, Eva Harris2

RESUMEN
Objetivos: Identificar mediante trascripción reversa-reacción en cadena de lapolimerasa (RT-PCR) y sitios específicos de restricción - reacción en cadena de la polimerasa (RSS-PCR) al agente causal del brote epidémico presentado en el distrito de Comas, Lima en abril del año 2005. Materiales y métodos: veinte muestras de suero
colectadas durante el brote de dengue fueron procesados por RT-PCR para determinar el serotipo, esta técnica se
realizó en un solo paso. Luego se aplicó latécnica RSS-PCR para la identificación del genotipo circulante y se
corroboraron los resultados posteriormente con aislamiento viral y secuenciamiento. Resultados: El análisis del RTPCR del ARN extraído de las muestras presentó un producto amplificado de 290pb que corresponden al dengue
serotipo 3 (DEN 3). El análisis de los productos de RSS-PCR del ARN extraído a partir de aislamientos de DEN3
correspondió al patrón C, incluido en el genotipo III. Los aislamientos de los virus dengue 3 en líneas celulares C6/36,
tipificadas por IFI y el secuenciamiento genético confirmaron los resultados obtenidos por las pruebas previamente
descritas. Conclusión: Durante el brote epidémico de dengue clásico en Lima, circuló el genotipo III del virus DEN 3.
Palabras clave: B rote de dengueclásico; virus dengue 3; tipificación molecular; RT-PCR; RSS-PCR; Perú
(fuente: DeCS BIREME).
ABSTRACT
Objectives: To identify the causative agent of the outbreak that occurred in Comas, Lima in April 2005 using reverse
transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and specific restriction site-PCR (RSS-PCR). Materials and
methods: 20 serum samples collected during the dengue outbreak wereassessed using RT-PCR for identifying
serotypes, this technique was performed in a single step. Later, the RSS-PCR method was used to identify the
circulating serotypes, and the results were corroborated by viral isolation and sequencing. Results: RT-PCR of viral
RNA taken from the samples showed a 290-pb amplified product corresponding to dengue virus serotype 3 (DEN 3).
RSS-PCR product analysis ofRNA from DEN 3 isolates corresponded to pattern C, included in genotype III. Dengue 3
virus isolates in C6/36 cell lines identified using indirect immunofluorescence and gene sequencing confirmed the
results obtained using the aforementioned tests. Conclusion: During the classic dengue fever outbreak in Lima, DEN
3 genotype III circulated.
Key words: Outbreak of classic dengue; dengue 3 virus;molecular typing; RT-PCR; RSS-PCR; Peru (source:
DeCS BIREME).

INTRODUCIÓN
El dengue es la enfermedad metaxénica viral más
importante en salud pública, causada por alguno de
los cuatro serotipos (DEN-1, 2, 3 y 4) del virus dengue, un virus ARN de cadena positiva de la familia
Flaviviridae, el cual produce un espectro de enfermedad que va desde una fiebre por dengue hasta el
denguehemorrágico / síndrome de choque (shock)
1
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por dengue, esta última una infección grave con anormalidad vascular y hemostática que puede llevar a la
muerte 1.
La vigilancia serológica de dengue se basa principalmente en la detección de anticuerpos específicos IgM,
mientras que la detección de serotipos circulantes se
realiza tradicionalmente por el aislamiento viral y su
identificación.Centro Nacional de Salud Pública, Instituto Nacional de Salud. Lima, Perú.
Division of Infectious Diseases, School of Public Health, University of California. Berkeley, CA, United States.

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Desde hace unos años se comenzó a aplicar la prueba de trascripción reversa- reacción en cadena de la
polimerasa (RT-PCR), que permite la identificación...