Ensayo de toxicidad aguda con larvas y juveniles de los peces Brachydanio rerio y Poecilia reticulata

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Ensayo de toxicidad aguda
con larvas y juveniles de
los peces Brachydanio rerio
y Poecilia reticulata
Felipe Fernando Martínez-Jerónimo
y Félix Espinosa Chávez

C lasificación

del ensayo :

AE

Principio de la prueba
La prueba se basa en la determinación de efectos de intoxicación aguda
(inmovilización o mortalidad), observados en un tiempo de exposición
de 96 horas, enlarvas de Brachydanio rerio (pez cebra) (figura 8.1) o
en juveniles de Poecilia reticulata (“gupy”) (figura 8.2), ambas especies
de peces dulceacuícolas. Durante este ensayo se expone al organismo
seleccionado a diferentes concentraciones de muestras problema que
pueden ser compuestos (puros o combinados) o productos formulados,
que deben ser solubilizados y estar biodisponibles en el agua dedilución.
Este ensayo también es utilizado para determinar efectos tóxicos agudos
ocasionados por efluentes con o sin tratamiento, así como muestras de
aguas de sistemas acuáticos diversos, que pueden recibir descargas de
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Amplia experiencia

Ensayo de toxicidad aguda con larvas y juveniles de peces

116 Ensayos para agua dulce

aguas contaminadas, así como aguas subterráneas quereciban influencias
contaminantes (lixiviados).
Figura 8.1. Organismos adultos de Poecilia reticulata. A) macho y B) hembra

Figura 8.2. Organismo adulto de Brachidanio rerio

Para realizar este bioensayo se debe garantizar la calidad del material de
prueba, teniendo control sobre el linaje y la forma de producción de los organismos de ensayo, siendo importante indicar el origen del loteutilizado.

Ensayo de toxicidad aguda con larvas y juveniles de peces

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La relevancia del empleo de peces como organismos de prueba radica en
su ubicación y función en los sistemas acuáticos, ya que además de ocupar
diferentes posiciones tróficas en los ecosistemas, al tratarse de organismos
vertebrados, son normalmente considerados como buenos representantes de
organismos de mayorcomplejidad y por lo tanto los efectos tóxicos observados
en ellos son más fáciles de comprender e interpretar, pues además muchas
especies de peces representan pesquerías de importancia comercial o son sujeto
de cultivo para la producción de alimentos o como especies ornamentales.
En el caso de B. rerio, la prueba se realiza con las larvas recién eclosionadas
del huevo con edad menor a 24horas, que cuentan con reserva de vitelo. En el
caso de los juveniles de P. reticulata, los organismos de prueba son los juveniles
recién avivados de la hembra vivípara (edad menor a 24 horas).
El bioensayo consiste en exponer a los organismos de prueba a diferentes
concentraciones de los compuestos problema o diluciones porcentuales de
efluentes y muestras de agua problema. Se requiere lapreparación de al menos
cinco concentraciones o diluciones, más una serie control. Estas soluciones
se preparan después de un ensayo exploratorio para la determinación del intervalo, siguiéndose preferentemente una serie geométrica base 2. Para cada
solución se debe contar con al menos tres réplicas, cada una de las cuales
constará de 10 individuos de las características antes descritas.
Se evalúala mortalidad cada 24 horas y hasta el término del bioensayo
(96 horas), haciendo anotaciones sobre el número de organismos afectados
(que se observan con movilidad o desplazamientos anormales). Los datos de
mortalidad acumulada al término de la prueba permiten construir la gráfica
concentración-efecto, que es la base para la determinación de la Concentración Letal Media (CL50).
La prueba esadecuada para la evaluación de los efectos tóxicos agudos
(letales) de efluentes con o sin tratamiento, muestras de agua de cuerpos de
agua receptores de descargas, compuestos puros y en mezclas de composición
conocida o desconocida, principios activos y productos formulados comerciales. Es además adecuada para la clasificación de la toxicidad de compuestos,
en el monitoreo de ecosistemas...