Ensayo

RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

Stanbio LiquiColor®
Albúmina
Procedimiento No. 2085
Para la determinación colorimétrica cuantitativa
de albúmina en suero o plasma

La muestra de elección es suero removido cuidadosamente
del coágulo,. El plasma puede ser utilizado a partir de sangre
recolectada ya sea con EDTA o heparina como anticoagulantes.
Estabilidad de la muestra
Laalbúmina es estable en suero durante una semana a
temperatura ambiente, 1 mes a 2-8°C e indefinidamente
cuando se congela.
Substancias interferentes

1,2.

RESUMEN Y PRINCIPIO

En 1964, el verde de rromocresol (BCG) fue reportado como
útil en la determinación cuantitativa de albúmina sérica por
Bartholomew y Delaney1 y por Rodkey2. Esta técnica de unión
fue publicada nuevamente un año mástarde por Rodkey3
quien describió un procedimiento colorimétrico inverso de
BCG específico para la albúmina a un pH de 7.05 y 615 nm.
Al mismo tiempo Watson4 reporto que el BCG era más sensible
para la albúmina que el anaranjado de metilo o el HABA
(ácido 2-(4'-hidroxiazo benceno)benzoico), dos compuestos
también utilizados en la cuantificación de albúmina sérica por
unión coloreada (teñida).El método de BCG se ha reportado libre de interferencias
para concentraciones bajas de lípidos, hemoglobina, bilirrubina (20 mg/dL) y salicilatos (60 mg/dL). Evite la hemólisis
severa de la muestra. Muestras altamente lipémicas se pueden
corregir mediante el uso de un blanco de suero.
PARÁMETROS DE PRUEBA
Analizador Automático
Longitud de onda …………………………….. 550 nm
Tipo de reacción………………………..……. Punto final
Dirección de reacción …………………..…… Creciente

Posteriormente Dow-Pinto 1 y Miyada et al6 reportaron la
linealidad del método de BCG en 5 g/dL, con interferencias
mínimas por lípidos, hemoglobina y bilirrubina, además de
evidencias de una gran especificidad y sensibilidad así como
una excelente correlación para los valores de albúmina
entre la técnica de BCG y la de electroforesis.Temperatura de reacción ……………….…... 37ºC

El método presentado es esencialmente el de Dumas,
Watson y Biggs7,8 modificado por el uso de citrato en lugar
del amortiguador de succinato, un amortiguador de baja
concentración y una lectura colorimétrica final a 550 nm en
lugar de 630 nm9.

Límite de absorbancia del blanco ……….… 0.450 A

Relación muestra / reactivo ………….……… 1:100
Tiempode equilibrio ……...………………….. 3 segundos
Tiempo de lectura ………………………….… 4 segundos
Fase Lag.............. ………………….………...

30 segundos

Máxima absorbancia …………….…………... 2.000 A
Valor normal bajo …………….…………….… 3.8 g/dL
Valor normal alto …………………………...… 5.1 g/dL
Linearidad ……...……………………………... 7.0 g/dL

REACTIVOS

pH ……………………………………………… 4.2 + 1.0

Reactivo de Albúmina (líquido)Absorbancia inicial …………………………… < 0.450

Contiene verde de bromocresol, 18.8 mg/dL en un regulador
de citratos, pH 4.2±0.05 a 298 K (25°C). También contiene
surfactantes.

Estándar ……………………………………… 6.0 mg/dL

Estándar de Albúmina (6.0 g/dL)
Solución acuosa de albúmina bovina fracción V. Contiene
azida de sodio como conservador

Los parámetros antes mencionados deben ser empleados
en laprogramación de los analizadores automatizados para
albúmina. Consulte el manual del instrumento para las
instrucciones de programación.

Precaución: Unicamente para uso diagnóstico in vitro.
Preparación del reactivo: El reactivo y el estándar están listos
para usarse.

PROCEDIMIENTO MANUAL

ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO
El reactivo es estable hasta su fecha de caducidad indicadaen la etiqueta cuando se almacena a 2 - 8ºC. Elñ Estándar es
estable únicamente en refrigeración (2-8ºC). Llevar el reactivo
y el estándar a temperatura ambiente antes de usarse.
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO INCLUIDOS

1. Pipetear en cubetas los siguientes volúmenes (en mL)
y mezcle bien.
Reactivo Estándar
Blanco (RB)
(E)

Muestra
(M)

Reactivo

1.0

1.0

1.0...