ensayo

IV. MATERIALES Y METODOS.

IV.1. METODOLOGÍA
IV.1.1. Metodología para el Primer Objetivo
“Evaluar la resistencia al ataque de Fusarium oxysporum y Meloidogyne sp.”
UBICACIÓN POLÍTICA
Se encuentra localizado en la Estación Experimental La Argelia, invernadero de vidrio del Área Agropecuaria y de Recursos Naturales Renovables de la Carrera de Ingeniería Agronómica, de propiedad de laUniversidad Nacional de Loja, ubicada a 4 km. del centro de la ciudad, en el sector La Argelia, Parroquia San Sebastián, cantón y provincia de Loja.

UBICACIÓN GEOGRÁFICA.
La Estación Experimental La Argelia se encuentra ubicada al sur - oriente de la hoya de Loja, en las siguientes coordenadas geográficas:
Latitud : 04º 04’ 00’’S
Longitud : 79º 12’ 00’’ W.
Altitud : 2.520 msnm y la cotamínima de 2 125 msnm.

UBICACIÓN ECOLOGÍCA
La Estación Experimental “La Argelia” se encuentra clasificada según L. R. Holdridge dentro de la provincia de humedad: subhúmeda; y dentro de las zonas de vida bosque seco Montano Bajo y bosque húmedo Montano Bajo (bs-MB/bh-MB). Tiene una temperatura media anual de 15,6 °C y una precipitación de 913,5 mm por año, presenta una humedad relativaambiental de 55 %.







IV.1.1.1. Recolección del material vegetal infestado.

Nematodos
1. Recolección del Inoculo (Nematodo).
Las muestras se recogieron de plantas infectadas por nematodos en cultivos de naranjilla en la Provincia de Zamora Chinchipe en el Cantón Yanzatza . Para ello se tomó raíces con nodulaciones, y se le colocó en fundas plásticas y sacos para evitar que se sequen ose deshidraten.
2. Extracción de los nematodos del material vegetal.
Se lava las raíces en una bandeja, luego se pesa 100 gramos de de raíces previamente picadas, luego se licuó la muestra por 10 segundos. Para suspender los nematodos, se tomo una muestra de 20 ml de agua de suspensión por maceta, fueron ocho plantas por maceta, un total de 111macetas.
3. Inoculo del Nematodo.
La inoculaciónse hizo mediante un vaso cuya medida era de aproximadamente 40 ml, que se tomó para ser aplicado a cada una de las macetas.
4. Evaluación.
El índice de agallamiento se evalúa en el sistema radicular, después 30 días a la inoculación, con la ayuda de la escala de 5 grados.
Cuadro 1. Escala de evaluación de para agallas producidas por Mloidogyne sp
GRADO
AGALLAS
REACCIÓN
1
1-2 Agallas y/omasas
Resistente
2
3-10 Agallas y/o masas
Moderadamente resistente
3
11-30 Agallas y/o masas
Moderadamente susceptible
4
31-100 Agallas y/o masas
Susceptible
5
Más de 100 Agallas
Altamente susceptible

Fusarium
1. Recolección del inóculo (Fusarium sp.)
La fuente de inóculo consiste en colectar raíces y cuello del tallo de planta que presente esta enfermedad ensembríos de naranjilla o de tomate. Para identificar las plantas con este problema, se hace una observación directa, en el momento de inspeccionar el cultivo.
Las muestras se colectan haciendo un corte en partes afectadas, las mismas que se guardan fundas platicas para su traslado al invernadero.
2. Preparación del inóculo e Inoculación.
Se procede como punto de inicio a cortar y diseccionar lasraíces y la corteza de los tallos afectadas con fusarium en pequeños pedazos de 2-3 mm, luego se toma un total de 1000 ml de agua (1 litro), que será preparado con 10 gramos de raíces afectadas por cada 20 ml, y se tomó aproximadamente 20 ml de la solución por macetade plántulas de naranjilla.
3. EVALUACIÓN.
Se evalúa la incidencia del patógeno a los 30 días después de la inoculación enfunción de la sintomatología que presentaron las plantas una vez realizada la inoculación, esto se hace con la ayuda de la escala de 5 grados.
Cuadro 2. Escala de evaluación de Fusarium oxysporum
NIVELES
SÍNTOMASEXTERNOS DE LA PLANTA
1
Sin síntomas
2
Flacidez de la Planta
3
Amarillamiento de las Hojas
4
Necrosamiento del tallo
5
Muerte de la Planta


IV.1.2. Metodología para...