entrevista




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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIAPAS








FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS OCOZOCOAUTLA
LABORATORIO DE BIOQUIMICA

PRÁCTICA #2
Actividad Glucolitica en eritrocitos





Alumnos:
Coutiño Hernández Diana Cristal
Domínguez Velázquez Zuleima Nathali
Hernández Pérez Florinda
Ruiz Moreno Valeria GuadalupeDra. Ana Olivia Cañas Urbina


Ocozocoautla de Espinosa, Chiapas a 05 de Noviembre de 2014
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1. Actividad glucolítica: eritrocitos
Objetivo.
Identificar la actividad glucolitica de los eritrocitos.
Antecedentes.
Cuando los glóbulos rojos se sintetizan en los progenitores nucleados de la médula ósea tiene una altaconcentración enzimática, que va disminuyendo paulatinamente a medida que envejece (FCBF, 2014), la forma de los eritrocitos puede cambiar cuando atraviesan los capilares, son células que se deforman desprendiéndose de su núcleo, de organelos como mitocondria y estructuras celulares como los ribosomas, esto para conferirle la ventaja para realizar su función de transportar oxígeno.
Por esta razón, eleritrocito maduro no tiene capacidad de fosforilación oxidativo (Ciclo de Krebs), ni síntesis de proteínas o lípidos. En consecuencia, su metabolismo, muy reducido, queda limitado a la glucolisis, ciclo de las pentosas fosfato, ciclo del 2,3bifosfoglicerato, reacciones de oxidorreducción para la detoxificación de sustancias oxidantes y ciertos aspectos del metabolismo nucleotídico. Estas rutas yreacciones son justamente las precisas para mantener sus necesidades metabólicas durante los 4 meses de vida media celular. El eritrocito requiere la energía para la realización del transporte iónico (sodio, potasio y cloro, principalmente), para el mantenimiento del hierro de la hemoglobina en su forma divalente, de los grupos sulfhidrilo de las proteínas enzimáticas y de la hemoglobina enestado reducido y para la conservación de su propia morfología celular. Por otro lado, contiene una concentración de fosfatos orgánicos del orden de 50 a 100 veces superior a la existente en el plasma, la mayoría de los cuales son de naturaleza orgánica (azúcares-fosfatos y ATP). Gracias a la producción de un fosfato orgánico característico, el 2,3bifosfato, el eritrocito puede modular, encombinación con el pH y la presión de CO2, el grado de eficiencia con que el oxígeno es cedido a los tejidos.

La glucolisis comienza con la incorporación de monosacáridos a la célula; la glucosa y la fructosa, transportadas al interior de la célula por un proceso de difusión facilitada, mediante un transportador común, son también fosforiladas en el carbono 6 por la hexoquinasa. La velocidad detransporte de la fructosa es mucho mayor que la de la glucosa, por lo que aquella puede acumularse en el interior del eritrocito. La presencia de glucosa a concentración fisiológica, inhibe la utilización in vivo de la fructosa, tanto en el transporte como en la fosforilación. Ello demuestra que la fructosa no es un substrato fisiológico para el eritrocito, y confirma que sólo se empleametabólicamente en ausencia de glucosa. La galactosa también es transportada por difusión facilitada, y una vez fosforilada a galactosa-1fosfato por la galactoquinasa, se introduce en la glucolisis mediante la intervención de la uridin bisfosfato glucosa (UDPG) y la acción de la galactosa 1fosfato uridil transferasa, la UDPG-4epimerasa y la fosfoglucomutasa. La glucosa 6-fosfato que se forma se isomeriza afructosa-6-fosfato mediante la fosfohexosa isomerasa, con lo que se inicia la secuencia de reacciones características de la glucolisis hasta la formación de lactato como producto final.

Materiales y métodos

Se realizó la medición de glucosa a partir de tres muestras con las siguientes características: M1) eritrocito con plasma sin centrifugar, M2) eritrocito reposado de 30 minutos sin...