Enzimas__2_2015_IA

Cinética enzimática
• Estudio de la velocidad de reacciones catalizadas
enzimáticamente
• La velocidad de una reacción catalizada por un
enzima depende de:
1. la concentración de moléculas desustrato [S]
2. la temperatura
3. la presencia de inhibidores
4. pH del medio, que afecta a la conformación
(estructura espacial) de la molécula enzimática

Determinación experimental de la velocidadinicial
Curva de progreso de una reacción

0

2

5 10 15 20 min

Enzima
Sustrato
Amortiguador
del pH

Tº

Cofactores

Para realizar una curva de progreso, incubamos tubos de ensayo como indica la
figura,a la Tº y pH óptimo para la enzima y a distintos tiempos. En cada tiempo
detenemos la reacción (con un ácido fuerte o calentando) y determinamos la
cantidad de producto generado, a continuaciónconstruimos un grafico
producto versus tiempo.

Determinación experimental de la velocidad inicial
Curva de progreso de una reacción

Equilibrio

2.25
2.00

S

producto,uM

1.75

P

1.50
1.25
1.00
0.750.50

Pendiente= vi = P/T

0.25
0.00
0

10

20

30

40

50

minutos
En el grafico hacemos una tangente a los primeros puntos mientras sea recto y de la
pendiente determinamos la vi. Tambiéndeterminamos que nuestra curva es recta hasta
aproximadamente los primeros 5 minutos, y ese va hacer nuestro tiempo de vi, donde la
reacción predomina hacia la formación de P y despreciamos K4. En el plato de lacurva
tenemos que la reacción alcanzo el equilibrio, las concentraciones de producto y
sustrato se hacen constantes en el tiempo y las velocidades de ínter conversión se
igualan.

Enzimas: Curva deprogreso

Modelo cinético de Michaellis-Menten
.Relaciona la velocidad inicial con la concentración de sustrato.
.Parte del supuesto del estado estacionario del complejo ES.

Hipótesis del estadoestacionario:
como la concentración de enzima es muy pequeña y
la concentración de sustrato muy grande en el primer
momento se llega a una concentración de complejo
enzima - sustrato que es constante...