Enzimas De Restricción

Páginas: 3 (743 palabras) Publicado: 5 de marzo de 2013
Digestión con enzimas de restricción





Las enzimas de restricción, también conocidas como endonucleasas, son enzimas que cortan los enlaces fosfodiester del material genético a partir de unasecuencia que reconocen. Estas enzimas reconocen una secuencia de 4-8 pares de bases en una secuencia de ADN de doble banda; este sitio de reconocimiento se denomina sitio de restricción,


Estasenzimas se encuentran en muchas especies de bacterias, donde funcionan in vivo como parte de un sistema de restricción y modificación. Este sistema es análogo a un sistema inmune, y le permitedistinguir a la bacteria entre su propio ADN y el ADN exógeno, siendo este último degradado por la enzima de restricción. El ADN propio no es reconocido por sus enzimas de restricción, puesto que previamentelo ha modificado por mutilación a través de la acción de una metiltransferasa (enzima que transfiere grupos metilo desde S-adenosilmetionina a bases específicas).


La mayoría de las enzimas derestricción reconocen secuencias palindrómicas (secuencias que se leen igual en dirección 5’-3’ en cualquiera de las 2 hebras) (Fig. 1)


[pic]


Figura 1. Ejemplo de secuencia palindrómicaExisten 3 tipos de enzimas de restricción:





Tipo I y Tipo III:


a. Tienen actividad de restricción (cortan) y modificación (metilan).


b. Cortan a cierta distancia de lasecuencia de reconocimiento, las Tipo I cortan lejos de la secuencia de reconocimiento, ya sea corriente arriba o corriente abajo. Las Tipo III cortan de 5-8 bases antes o después de la secuencia quereconocen.


c. Necesitan ATP para moverse a través de la molécula de DNA, desde el lugar de reconocimiento hasta el sitio del corte.








Tipo II:


a. Sólo tienen actividad derestricción.


b. Cortan de manera consistente y predecible dentro de la secuencia que reconocen.


c. Sólo requieren Mg++ como cofactor.


d. No necesitan ATP.


Las endonucleasas se nombran a...
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