enzimas de restriccion
POSITIVOS
*Hacer mapa de restricción de un plásmido o bacteriófago.
* Fragmentar ADN para separación por electroforesis.
* Generación de fragmentos para ser clonadosen los vectores apropiados, y crear ADN recombinante.
NEGATIVOS
La restricción no es absoluta. Algunos de los fagos infectantes escapan a la restricción por haber adquirido mutaciones en lasdianas específicas o por simple negligencia de la maquinaria de restricción.
ADN ligasa
*Sella dos segmentos de ADN entre sí en un proceso llamado ligación.
*Se puede hacer que un fragmento de ADN seintegre a un elemento génico auto replicante.
Se pueden alterar secuencias de ADN produciendo versiones modificadas de los genes.
Vectores
*Albergaran pedazos grandes en lo posible de genesenteros.
* Se puede también tener todo el genoma cortado en pedazos y clonado para posteriormente estudiarlo.
Los virus usados pueden ser muy peligrosos. Como el VIH.
Plasmidas
*Adoptan unaconformación tipo doble hélice al igual que el ADN de los cromosomas.
* Se replican y transcriben independientes del ADN cromosómico.
La resistencia a los antibióticos ha sido encontrada en gérmenespatógenos causantes de enfermedades tales como: tifoidea, meningitis, gonorrea y otras.
Marcadores Genéticos
*Segmento de ADN cuya herencia se puede rastrear.
* Sirve para predecir las cualidades de unorganismo.
Existen marcadores que tienen riesgo de causar cáncer.
PCR
* El ADN amplificado puede ser clonado directamente o usado en una gran variedad de procedimientos analíticos
* Dosoligonucleótidos son sintetizados cada uno como secuencia complementaria de una hebra opuesta del ADN blanco en posiciones que estén más allá de aquellas donde termina el segmento a ser amplificado.
Tienen unalto riesgo de contaminarse.
ADNc
* Las secuencias de ADNc corresponden únicamente secuencias codificadoras de proteínas.
* Clonación de genes integrando el ADNc correspondiente al gen en un...
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