enzimas practico

Integrantes:

Camila Ábalo Grupo 38 B
Alejandra Peña Grupo 37 B
Año: 2015
CBCC1

1. Objetivos:

a. Evaluar el efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad inicial de una
reaccióncatalizada.
b. Determinar los parámetros cinéticos (Km y Vmáx) de la invertasa de levadura.

2. Tabla de datos y gráfica de la curva de calibración:

a. Tabla:

[Glucosa] mM
0

Abs 570nm
(U.A)
0

2

0.0334

0.004 *

6

0.156

8

0.227

10

0.206

* Este punto es descartado a la hora de graficar para obtener un mejor valor del coeficiente
de correlación.
b. Gráfica Curva de Calibración:

Abs 570 nm
y= 0,023x + 0,000
R² = 0,934

0,3

0,25

0,2
Abs 570nm
0,15

Lineal (Abs 570nm)

0,1

0,05

0
0

5

10

15

[Glucosa] mM

c. Cálculo de Épsilon:
Pendiente = ɛ
ɛ = 0.023 𝑚𝑀 −1

3. Tabla de datos de laenzima:
a. Cálculo de la concentración de glucosa para cada tubo:
Abs= ɛ.c.l
C=
Tubo 1. C=

𝑨𝒃𝒔
ɛ𝒙𝒍

0.062 𝑛𝑚
0.023 𝑥 1

= 2.69 𝑚𝑀

Tubo 2. C=

0.212 𝑛𝑚
0.023 𝑚𝑀 −1 𝑥 1

Tubo 3. C=

0.214 𝑛𝑚
0.023 𝑚𝑀−1 𝑚𝑀 −1 𝑥 1

Tubo 4. C=

0.553 𝑛𝑚
0.023 𝑚𝑀 −1 𝑥 1

= 24.0 𝑚𝑀

Tubo 5. C=

0.776 𝑛𝑚
0.023 𝑚𝑀 −1 𝑥 1

= 33.7 𝑚𝑀

Tubo 6. C=

0.276 𝑛𝑚
0.023 𝑚𝑀 −1 𝑥 1

= 9.21 𝑚𝑀
= 9.30 𝑚𝑀

= 12 𝑚𝑀

Luego se divide laconcentración de glucosa entre el tiempo de incubación de la
enzima y luego sobre dos ya que por cada molécula de Sacarosa hidrolizada se forman
una de glucosa y otra de fructosa, para obtener laVelocidad inicial de la reacción.

Vo=

𝐺𝑙𝑢𝑐𝑜𝑠𝑎 𝑚𝑀
15 𝑚𝑖𝑛

2

Tubo 1. Vo=

Tubo 2. Vo=

Tubo 3. Vo=

Tubo 4. Vo=

Tubo 5. Vo=

Tubo6. Vo=

2.69 𝑚𝑀
15 𝑚𝑖𝑛

2
9.21 𝑚𝑀
15 𝑚𝑖𝑛

2
9.30 𝑚𝑀
15 𝑚𝑖𝑛

2
24.0 𝑚𝑀
15𝑚𝑖𝑛

2
33.7 𝑚𝑀
15 𝑚𝑖𝑛

2
12 𝑚𝑀
15 𝑚𝑖𝑛

2

= 0.089 𝑚𝑀/𝑚𝑖𝑛
= 0.307 𝑚𝑀/𝑚𝑖𝑛
= 0.31 𝑚𝑀/𝑚𝑖𝑛

= 0.8 𝑚𝑀/𝑚𝑖𝑛
= 1.123 𝑚𝑀/𝑚𝑖𝑛

= 0.4 𝑚𝑀/𝑚𝑖𝑛

b. Tabla:

[Sacarosa] (mM)
0
10
20
50
100
300
360

Abs a 570 nm
En 15 min
0
0.0620.212
0.214
0.553
0.776
0.276

[Glucosa] mM
En 15 min
0
2.69
9.21
9.30
24.0
33.7
12

Vo
mM/min
0
0.089
0.307
0.31
0.8
1.123
0.4*

* Este punto es descartado a la hora de graficar para...