Enzimas
Se utilizan la tecnología de ADN recombinante. Esta técnica consiste en obtener elgen que codifica para la proteína de interés para después insertarlo en un vector que, generalmente tiene una alta frecuencia de replicación. Posteriormente, varias moléculas del vector, con el genclonado, se introducen en un organismo hospedero donde se va a producir la enzima de interés, proceso conocido como transformación; el gen, una vez clonado, puede ser sujeto a modificaciones en sussecuencia, con el fin, por ejemplo, de aumentar la termoestabilidad, mejorar la eficiencia catalítica o modificar la especificidad enzimática. Los avances, utilizando esta tecnología, han hecho posibleclonar y manipular cualquier gen, así como sobreproducir la proteína de interés en un hospedero de naturaleza bacteriana o fungal, preferentemente Escherichia_ coli y Bacillus subtilis_ se utilizan comohospederos cuando se busca una alta expresión de enzimas no glicosiladas. En particular se elige al bacilo cuando se quiere que la enzima se produzca extracelularmente. Levaduras como Saccharomyces,Kluyveromyces_ _o Pichia_ pastoris _y hongos como Aspergillus_ Níger_, son los hospederos de elección cuando se trata de expresar una proteína extracelular que requiere ser glicosilada. Además deproducirse enzimas de origen bacteriano y fungal, se producen también enzimas de origen animal y vegetal.
Las herramientas moleculares con las que se llevan a cabo los procesos antes descritos, sontambién enzimas. Se utilizan ADN endonucleasas sumamente específicas para cortar la doble cadena, la ADN ligasa se utiliza para restaurar el enlace fosfodiéster de la doble cadena cuando se va a insertar...
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