enzimas
ORREGO
FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
BIOQUIMICA
ENZIMOLOGÍA
Pedro Lezama
plezamaa@upao.edu.pe
P. Lezama - UPAO bioqupao@.yahoo.com
ENZIMAS
• Definición
– Catalizadores biológicos
• Función
–Viabilizar la actividad de las células por
su participación en todas las reacciones
biológicas
• Naturaleza química: proteínas globulares
principalmente, exceptolas RIBOZIMAS (RNA
con propiedades catalíticas)
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ESTRUCTURA ENZIMATICA
Estructura
básica
Holoenzima
Proteína
Cofactor
Apoenzima o
Apoproteína
Ribozimas
RNA
Grupo Prostético
Abzimas
Anticuerpos Granzimas
Actividad citotóxica
(apoptosis)
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Coenzima
- Nucleotidos
- Comp. Vit. B
Glucosa
Sitio
catalítico
Fructosa
Enzima(sacarasa)
4
Sustrato
(sacarosa)
Productos son
liberados
1
E+S
Enzima disponible con
sitio catalítico vacío
[ES]
[EP] P+E
3
Sustrato es
convertido a
productos
2
P. Lezama - UPAO
Sustrato se une
a la enzima por
encaje inducido
Modelo de Acción enzimática
Energia de activación sin enzima
Diferencia entre
la energia libre
de y P
Energia deactivación con
enzima
S
P
Establecer las
diferencias
Camino de la Reacción
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MODELOS DE ACCION ENZIMATICA
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Modelo llavecerradura
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Modelo del encaje (acoplamiento)
inducido
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CLASIFICACIÓN DE ENZIMAS
1. Oxidoreductasas transferencia de electrones
2. Transferasas reacciones de transferencia de
grupo (noagua)
3. Hidrolasas reacciones de hidrólisis (participa agua)
4. Liasas catalizan reacciones reversibles de
adición de un grupo funcional a un doble enlace
5. Isomerasas transferencia de grupos dentro de la
misma molécula para dar isómeros
6. Ligasas Formación de enlaces C-C, C-S, C-O y CN por reacciones de condensación acopladas a
hidrólisis de ATP
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Factores que afectanla actividad
enzimática
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Factores Básicos
1. Temperatura
2. pH
3. Concentraciones de:
– A. Enzima
– B. Sustrato
– C. Producto
(retroalimentación
negativa)
4. Activadores
– Cofactores
– Modificaciones
covalentes
5. Inhibidores
– Competitivos
– No competitivos
– Enzimas alostéricas
6. Localización
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S
+
E
↓
P
60
20
0Incremento en concentración de S
80
(en un periodo de tiempo
40
Producto
Sustrato (mmol)
P. Lezama - UPAO
8
6
4
2
0
8
7
6
5
4
3
2
1
0
Concentración constante ES en estado de transición
S
P
Concentración
E
ES
Tiempo de Reacción
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EFECTO DE LA TEMPERATURA
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Efecto del pH
ENZIMA
Analizar algunas
deellas
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Fosfatasa alcalina
Lipasa pancreática
Quimotripsina
Tripsina
Catalasa
Carboxipeptidasa
Amilasa salival
Fosfatasa ácida
Pepsina
pH Prom.
9.5
8.0
8.0
7.9
7.6
7.5
6.8
5.0
1.5
CINÉTICA ENZIMÁTICA
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vo
Efecto de S
Vmax
[S]
v = Vmax [S]
Km
1
v
v = Vmax
2
Vmax
3
2
¿Cuando se alcanza la
velocidadmáxima?
K
P. Lezama - UPAO
m
[S]
Linewever - Burk
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INHIBICION ENZIMATICA
Tipo de inhibidores
COMPETITIVO
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Tipo de inhibidores
NO COMPETITIVO
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Tipo de inhibidores
ACOMPETITIVO
Inhibidor acompetitivo
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RESUMEN DE INHIBICION
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Inhibición enzimática (Resumen)
Ploteodirecto
I
Competitiva
No-competitiva
Vmax
vo
I
I
[S], mM
Vmax no se altera
Km se incrementa
1/vo
Km = Km’
1/vo
I
1/[S]
Acompetitiva
Vmax
Vmax’
Vmax’
[S], mM
Vmax disminuye
Km no se altera
1/ Vmax
1/Km
I
Vmax
vo
Km Km’
Doble Reciproco
I
I
Km’ Km
Vmax & Km disminuye
1/vo
I
1/ Vmax
1/Km
1/[S]
P....
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