enzimas


TUBO No.



TESTIGO
PROBLEMA

T1
T2
T3
T4
T5
T6
1
2
3
4
5
6
Sacarosa 0.45M (mL)
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
Regulador de acetatos 0.05M pH4.7 (mL)
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
Agua (mL)

0.75
0.75
0.75
0.75
0.75
0.75
0.75
0.75
0.75
0.75
0.75
0.75
Preincubación (°C) 5 min.
0
25
37
50
7592
0
25
37
50
75
92
Enzima 10g/mL
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.0
0.25
0.25
0.25
0.25
0.25
0.25
Incubación (°C) 5 min.
0
25
37
50
75
92
0
25
37
50
75
92
Inactivación
0.5 mLde 3,5-DNS + 0.25 mL de enzima
0.5 mL de 3,5-DNS a cada tubo
Desarrollo del color
5 minutos a 92°C (en baño maría)
Dilución
Enfriar en un baño de hielo y diluir con mL de agua en cada tubo
LEEREN UN ESPECTROFOTOMETRO A 540 nm
Absorbancia
0.002
0.000
0.002
0.003
0.006
0.077
0.279
0.549
0.476
0.351
0.043
0.059
Azúcar reductor (moles)
0.021
0

0.021


0.031

0.0630.819

2.96

5.84
10.12
7.46
0.457
0.62
Velocidad
(unidades internacionales)
0.0021
0
0.0021
0.0031
0.0063
0.0819
0.296
0.584
1.010
0.746
0.0457
0.062Y=0.094x -0.0104
[Azúcar reductor]=
[A.R]= = 0.34
[A.R]= = 0.46
[A.R]= = 0.74
[A.R]= = 0.55
[A.R]= = 1.05
[A.R]= = 1.06











TUBO No.

TESTIGO

PROBLEMAS


1
2
3
4
5
6
Sacarosa 0.2M (mL)

0.5
0.10
0.20
0.30
0.50
0.80
1.0
Reguladorde acetatos
pH=4.7 (mL)
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
Agua (mL)

0.5
0.90
0.80
0.70
0.50
0.20
0
Preincubación

5 min a temperatura ambiente
Enzima 10 g/mL (mL)
0.0
0.50.5
0.5
0.5
0.5
0.5
Incubación
5 min a temperatura ambiente

Inactivación
0.5 mL 3,5-DNS+0.5 mL de enzima


0.5 mL de 3,5-DNS + 0.25 mL de enzima
Desarrollo de color
5 min a 92°...