Enzimas

PRACTICA 3.
ENZIMAS

Ingeniería Agroindustrial, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad del Cauca, Vereda las Guacas, Popayán Colombia






Resumen

Para analizar el comportamiento de las enzimas, en diferentes condiciones como temperatura, por influencia de pH, por especificidad de la enzima e influencia de activadores e inhibidores, en la práctica se emplearon dosenzimas la Amilasa y la Invertasa, la amilasa para observar los cambios en la solución de almidón y la invertasa para observar los comportamientos en la sacarosa. Al realizar la práctica se observó los cambios de coloración de las diferentes muestras, para así determinar cómo actúan estas según las condiciones en las que se encuentran.

Introducción:
Las enzimas son proteínas que presentanactividad catalítica la cual está relacionada con la presencia de unas regiones especiales responsables de la fijación, activación del sustrato y el centro activo. Las particularidades de las enzimas son su especificidad y sensibilidad al cambio de la temperatura, pH del medio como también la presencia de inhibidores y activadores.
Con respecto a la temperatura, la temperatura del medio influye muchoen la activación enzimática .
La temperatura óptima para estas reacciones es la temperatura corporal que esta entre 36 y 41 grados C, el aumento de la temperatura causa una aceleración de la reacción como consecuencia de la activación del sustrato, pero de igual forma un aumento pequeño de temperatura causa el debilitamiento de los enlaces que mantienen la conformación de la molécula. El cambio depH altera la ionización de grupos correspondientes los grupos amino y carboxilo, rompiendo los enlaces que forma los centros catalíticos.
Objetivos:
Analizar los efectos causados por cambio de temperatura, pH, activadores e inhibidores y especificidad enzimática. E identificando las reacciones presentadas en cada una de la pruebas anotar si son positivas o negativas, aprender elfuncionamiento de dichas enzimas especialmente la amilasa en diferentes condiciones.

Procedimiento:
Obtención de la muestra de saliva
Para este procedimiento se tomó una cantidad de 25 ml de agua destilada con la que se enjuago la boca por 2 minutos, uno de los integrantes de la práctica, y se depositó en un beaker.
Labilidad térmica de las enzimas
En tres tubos de ensayo se adiciono 1 ml desaliva del proceso anterior, el 1 se puso a hervir durante 2 minutos, el tubo 2 se puso a temperatura ambiente y el tubo 3 se colocó en baño frio 00 C, luego a cada uno se le adiciono 2 ml de solución almidón y se colocaron dentro del termostato a 370 C por 10 minutos, después se les adiciono 2 gotas de lugol y se anotaron los resultados de color.
Influencia del pH sobre la actividad de lasenzimas
Se vertió en tres tubos de ensayo 2 ml de las soluciones amortiguadoras con distintos pH (5.0, 6.8, 8.0) se le adiciono a cada uno 1 ml de saliva diluida (amilasa) y 2 ml de la solución de almidón, se dejaron los tres tubos en el termostato por 370 C después a cada tubo de le adiciono una gota de lugol y se anotaron los resultados.
Especificidad de la enzima
Se utilizó 4 tubos de ensayoen el 1 y 2 se le adiciono 2 ml de solución de almidón, en el tubo 3 y 4 se adicionaron 2 ml de solución de sacarosa en los tubos 1 y 3 se adiciono 1 ml de saliva diluida amilasa y en los tubos 2 y 4 se adiciono solución de invertasa, los 4 tubos se colocaron a encubar en el termostato durante 10 minutos a 370 C, luego a los tubos 1 y 2 de le adiciono 1 gota de reactivo de lugol y en los tubos 3 y4 se adiciono 0,5 ml de reactivo fehling y se calentó estos últimos al baño de maría a 1000C durante 5 minutos y luego se anotó los resultados.
Influencia de los activadores e inhibidores
Se vertió en 2 tobos de ensayo 2ml de solución de almidón, en el tubo 1 se añadió 1 ml de solución de cloruro de sodio 1%, en el tubo 2 se le añadió 0.5 ml de solución de sulfato cúprico 1% y en ambos tubos...