Enzimas

QUiMICA CLiNICA 1992; II (3) 176-180

[ DOCUMENTOS

Metodo recomendado para la determinacion en rutina de la
concentracion catalitica de fosfatasa alcalina en suero sanguineo
humano
Comite Cientifico, Comision de Enzimas.
Sociedad Espanola de Quimica Clinica.

Documento H, Fase 3. Version 1
Preparado por R. Rueda, R. LOpez, A. Galan, F. Canalias, F. Barragan, EJ. Gella

I.Introduction
La fosfalasa alcalina (FAL, monoester orlofosf6rico
fosfohidrolasa, EC 3.1.3.1.) cataliza en media alcalino la
hidr6lisis de gran variedad de estcrcs monofosfatos or·
ganicos con formaci6n de un alcohol 0 fenol y de un ion
fosfato.

H20+ R-P FAL > R-OH + Pi
pH>9
Los grupes fosfato pueden transferirsc de un complejo eozima-fosfato al agua 0 a olros aceptorcs presentes
en eI media dereacdOn.
La fosfatasa alcaJina prescnta una baja especificidad
de sustrato. Necesita la presencia de un radical de cicido
ortofosf6rico con dos grupos hidroxil no estedficados.
siendo el ortofosfato monosustilUido el unico que es hidrolizado (l).
Las fosfatasas alcalinas son metalo-glicoprotcinas compueslas de subunidades que contienen al menos un ato·
mo de zinc por unidad monomerica (2). Sumasa molecular es de aproximadamente 120000 daltons (3).
Se conocen al menos tres loci implicados en la sintesis
de las diferentes formas de fosfalasa alcalina. que dan
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Qulmica Clinica 1992; II (3)

lugar a Ires grupos de formas multiples: las fosfatasas alcatinas de odgen placentario. las de origen inteslinal y
las de origcn oseo, hepalico y renal (4).
En el suero de pacientes conciertas patologias pueden
presentarse las siguientes formas atipicas de fosfatasa alcalina:
-Fosfatasa alcalina biHar (5). Forma dc masas molecular relativa c1evada, que es un indicador muy sensible
de colestasis y de metastasis hepaticas.
-Inmunocomplcjos de fosfalasa alcalina e IgG (6).
Presentes en algunas enfermedades autoinmunes. carcinoma hepalico y hepalitis virica.
-Formas oncofetales(Kasahara) y carcinoplacentarias
de fosfatasa alcalina (Regan). Presentes en algunas enfermedades malignas.
En el suero de personas sanas se encuetras solamenle
las formas 6sca. hepatica, en ocasiones la intestinal. y
la placentaria en embarazadas. Las elevaciones de concentradon calalitica mas frecuentes en el suero, en condiciones patol6gicas, corresponden a las formas hepatica y osea. Asi.en enfermedades hepatobiliares se produce
un aumenlO de la forma hepatica, encontrandose las mayores elevadones en la iclericia obstructiva, especialmeme
cuando es de origen extrahepatico. En enfermedades que

afectan al hepatocito, como la hepatitis, las elevaciones
de fosfatasa alcalina son en lodo caso moderadas. La fosfalasa alcalina 6sea se eleva en aquellos procesos en los
que hay unaumento de la actividad osteoblastica.
Para la determinacion de la concenlraci6n catalitica de
fosfatasa alcalina en suero humano, se recomienda actualmenle, el usa de metodos espectromelricos continuos
y el empleo del suS(rato p-nitrofenilfosfato.
En la eleccion del lampen las recomendaciones de las
sociedades cientificas se distribuyen de la siguieme forma: Alemania (7), los paisesescandinavos (8) y Reino
Unido (9) ulilizan dietanolamina, mientras que Francia (10), Holanda (lJ), Suiza (/2), ESlados Unidos (13) y
la Federacion Imernacional de Qufmica Clinica (14)
recomiendan el uso de 2-amino-2-melil-l-propanol. EI
tampon 2-amino-2-metil-I-propanol presenta una serie de
ventajas sobre el tampon dietanolamina que estan
documentadas (/5).
La American Asociation of ClinicalChemistry y [a
IFCC en su metoda recomendado de la fosfatasa alcalina introducen zinc y acido N-hidroxietiletilenodiamino
triacetico (HEDTA) como sistema tampon de iones (16).
Por otra parte, la adicion de magnesio es esencial para
la estabilidad y actividad de la enzima (17).
Esta Comision, despues de eSlUdiar los melodos recomendados por las distimas sociedades ciemificas, ha
oplado por el...