enzimas


Facultad de Ciencias / I Semestre 2013
U.A 37 / BIO0221 / Bioquímica / Laboratorio








INFORME DE LABORATORIO Nº1
“ESPECTROFOTOMETRÍA”



Profesor Cátedra: Dr. Carlos Herrera
Profesor de Laboratorio:
Alumnos: Cristina Díaz
America Metzdorf
Judith Riquelme
Sección: 3
Fecha de entrega: viernes 12 abril

INTRODUCCIONRESULTADOS

I PARTE: Preparación de solución stock de Anaranjado de metilo (A.M)

A. Datos teóricos.
a. Concentración de solución stock de A.M: 10 mg%
b. Concentración de solución diluida de A.M para el espectro de absorbancia: 0.05 mg%
c. Concentración de solución diluida de A.M para la curva de calibración: 0.005mg%

Dilución deanaranjado de metilo 10 mg% a anaranjado de metilo 0.05 mg%
10mg  100 mL 0.05mg  100 mL
x  1 mL x  1 mL
x = 0.1 mg/mL x = 0.0005 mg/mL

C1 X V1 = C2 X V2
0.1 mg/mL X V1 = 0.0005 mg/mL X 100 mL
V1 = 5.00 mL

Dilución de anaranjado de metilo 0.05 mg% a anaranjado demetilo
0.05mg  100 mL 0.005 mg  100 mL
x  1 mL x  1 mL
x = 0.0005mg/mL x = 0.00005 mg/mL

C1 X V1 = C2 X V2
0.0005 mg/mL X V1 = 0.00005 mg/mL X 100 mL
V1 = 10.0 mL






II PARTE: Espectro de absorción de Anaranjado demetilo
A. TABLA N°1: DATOS EXPERIMENTALES
Longitud de onda (nm)
Absorbancia (D.O)
% Transmitancia
400
0.123
75.3
420
0.148
71.1
440
0.161
69.0
460
0.194
63.9
480
0.187
65.0
500
0.131
73.7
520
0.062
86.7
540
0.018
95.9
560
-0.001
97.1
580
-0.005
101.2
600
-0.007
101.6

Determinación de transmitancia














GRÁFICO N°1: Absorbanciade anaranjado de metilo 0.05mg% vs. Longitud de onda


GRÁFICO N°2: % Transmitancia de anaranjado de metilo 0.05mg% vs. Longitud de onda

B. De acuerdo con el espectrograma:
Absorbancia máxima: 0.194
Transmitancia mínima: 0.639
Longitud de onda de trabajo: 460 nm
III Parte: Curva de calibración
A. TABLA N°2 DE DATOS EXPERIMENTALES
Tubo N°
% Transmitancia
Absorbancia (D.O)Concentración (mg%)
1
93,5
0,029
0.001
2
85,7
0,067
0.002
3
76,2
0,118
0.003
4
91,4
0.170
0.004
5
63,9
0.194
0.005
6
100
0,000
---


Calculando las concentraciones
1mg → 100 mL 0,02mg → 10 mL
X → 2 mL X → 100 mL
X= 0,02 mg X= 0,2 mg%

1mg → 100 mL 0,04mg → 10 mLX → 4 mL X → 100 mL
X= 0,04 mg X= 0,4 mg%

1mg → 100 mL 0,06mg → 10 mL
X → 6 mL X → 100 mL
X= 0,06 mg X= 0,6 mg%


1mg → 100 mL 0,08mg → 10 mL
X → 8 mL X → 100 mLX= 0,08 mg X= 0,8 mg%

1mg → 100 mL 0,10mg → 10 mL
X → 10 mL X → 100 mL
X= 0,10 mg X= 1 mg%


A. GRÁFICO N°3: Absorbancia (D.O) vs. Concentración (mg%)


y = 41,257x - 0,0068 R² = 0,9893




IV.-PARTE : MUESTRA PROBLEMA
a.- Nº de muestra : 2 .
b.-% de Transmitancia : 85,3 .
c.- Absorbancia (D.O.) : 0,069 .
d.-Concentración de la solución problema de Anaranjado de Metilo: 1,84x10-3 mg%

Cálculos para la muestra problema Nº 2
A= -0,0068
B=41,257
r =0,9893
Ecuación de la recta, para determinar la concentración de la muestra problema:
y=mx+b
y=41,257x - 0,0068
En este caso y es igual a la absorbancia de la muestra...