enzimas

MARCO TEÓRICO
Los enzimas son proteínas que tienen la función de acelerar reacciones químicas en sistemas biológicos. Muchas reacciones necesarias para las células vivas no se producirían con la suficiente rapidez a la temperatura y el pH del cuerpo sin enzimas. El término con el que se produce la rapidez a la que se produce una reacción química, catalizada o no, es la velocidad. [Devlin, 2004]Los enzimas están formados por una parte proteica o apoenzima inactiva en muchos de los casos desde el punto de vista catalítico. La unión entre un cofactor o grupo prostético de forma covalente a la proteína da lugar a lo que denominamos holoenzima, que ya presenta actividad catalítica (enzima activa). Los cofactores son moléculas pequeñas de naturaleza orgánica o inorgánica que, se requierenpara presentar actividad. Los cofactores inorgánicos pueden estar constituidos por uno o varios iones o por un complejo orgánico o metaloorgánico, en cuyo caso recibe el nombre de coenzimas. Las coenzimas no suelen ser específicas de un determinado tipo de apoenzima.
La molécula sobre la cual actúa la enzima para originar el producto, se denomina sustrato. Dado que la mayoría de las reaccionesbioquímicas son reversibles, los productos de una determinada reacción considerada en un sentido serán los sustratos si consideramos la misma reacción en sentido inverso. Esto, puede condicionar el nombre de la enzima que cataliza una reacción determinada, si consideramos la reacción de un sentido o en otro. [Garrido, Teijón, 2006]
Enzima lacasa
Las lacasas (bencenodiol: oxígenooxidorreductasas, EC 1.10.3.2) son enzimas que contienen cobre y catalizan la conversión oxidativa de una variedad de productos químicos, tales como mono-, oligo-y polifenoles, y aminas aromáticas. Se han propuesto lacasas para participar en la transformación de la materia orgánica y xenobióticos, así como interacciones microbianas. Se han propuesto varios ensayos de lacasa y se utiliza en los suelos. Lascondiciones de pH óptimas para la lacasa sustratos 2,2 '-azinobis-3-etilbenzotiazolina-6-sulfónico (ABTS, pH 3-5), 2,6-dimetoxifenol (4-5,5), L- 3,4-dihidroxifenilalanina (DOPA; 4-6), guayacol (3,5-5), 4-metilcatecol (3,5-5), y siringaldazina (5,5-7,0) son similares entre las lacasas purificada de Trametes versicolor y Pyricularia sp. y extractos de suelo, la afinidad y de enzimas purificadas ( K M ) ylos extractos de suelos también fueron similares. Los ensayos de lacasa mostraron solapamiento especificidad con peroxidasas tirosinasa y ligninolítico cuando el peróxido de hidrógeno está presente. El ensayo de oxidación de ABTS es capaz de detectar de forma fiable la presencia de 13,5 pg ml -1 o 0,199 × 10 -12  moles ml -1 de T. versicolor lacasa, que es tres veces más sensible que elensayo-dimetoxifenol basado en 2,6 y más de 40 veces más sensible que cualquiera de los otros ensayos. Los compuestos de baja masa molecular del suelo derivados y fúlvicos aislada y ácidos húmicos influyen en los ensayos de lacasa y deben ser retirados de los extractos de suelo antes de realizar las mediciones de la actividad de la enzima.
El pH óptimo y los parámetros cinéticos de las lacasas aisladas yextractos de suelos son similares.  El ensayo de lacasa con ABTS tiene el límite de detección más bajo de 13,5 pg de proteína.  Los ensayos con DOPA y 2,6 dimetoxifenol sufren de interferencia con la tirosinasa. La enzima lacasa se inhibe en presencia de compuestos de bajo peso molecular del suelo.
Las reacciones catalizadas de lacasa incluyen la polimerización de monómeros, la degradación de lospolímeros y la oxidación de compuestos fenólicos [ Sharma P y colaboradores, 2007 ]. Las lacasas pueden actuar sobre compuestos no-fenólicos por los mediadores que emplean, que se someten a un ciclo de oxidación-reducción, yendo y viniendo por lo tanto electrones entre el compuesto no fenólico y la enzima. Estos sistemas lacasa mediador (LMS) se han utilizado en una serie de procesos incluyendo...