Enzimas

ENZIMAS USADAS EN BIOLOGIA MOLECULAR Enzimas de restricción

Enzimas de restricción
Corte: - Extremo cohesivo - Extremo romo

ENZIMAS USADAS EN BIOLOGIA MOLECULAR
Enzimas de restricción ADNpolimerasa : Síntesis de ADN in vitro, secuenciación (Taq polimerasa: PCR) ADN ligasa

Ligasa

ENZIMAS USADAS EN BIOLOGIA MOLECULAR
Enzimas de restricción ADN polimerasa ADN ligasa Transcriptasainversa Polinucleótido kinasa Fosfatasa alcalina, etc. (Taq polimerasa)

ENZIMAS USADAS EN BIOLOGIA MOLECULAR

Técnicas de clonado de ADN

In vivo In vitro (PCR)

Clonado

Vectores declonado
Plásmidos

Vectores de clonado
Plásmidos Bacteriófagos

Bibliotecas

Bibliotecas

Vectores de clonado
Plásmidos Bacteriófagos Construcción de genotecas: - genómicas - de cDNAVectores de clonado
Plásmidos Bacteriófagos Cósmidos

Transferencia de material genético a bacterias - Conjugación - Transducción - Transformación

Conjugación

Transducción

Vectores declonado procariotas
Plásmidos Bacteriófagos Cósmidos

Vectores de clonado eucariotas
Baculovirus YACs Virus de mamíferos (ej.: vectores retrovirales)

Técnicas de clonado de ADN

In vivo

Invitro (PCR)

Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)

Electroforesis

Electroforesis

Métodos de detección
- Hibridación de ácidos nucleicos - PCR

Hibridación de ácidos nucleicosSouthern-blot

Southern-blot - Sustrato: ADN Sonda: ADN o ARN Northern-blot - Sustrato: ARN Sonda: ADN o ARN

Western-blot - Sustrato: proteína Detección mediante anticuerpos

Hibridaciónin situ

Hibridación in situ fluorescente (FISH)

Whole mount

in situ

hybridization

GFP (proteína fluorescente verde)

Hidromedusa Aequorea victoria

Transgénesis
-Integraciónestable de ADN extraño dentro del genoma del huésped, confiriendo nuevas propiedades al mismo. -Muy usada para estudiar la función de los genes en un organismo vivo.

Individuos transgénicos...