enzimas

Universidad de los Andes
Facultad de Ciencias
Departamento de Biología
Practica de Biología 10
Luis Manuel Casanova Pino, CI: 23722840
Práctica Nº3 Catálisis enzimática
Introducción
Las enzimas son, en su gran mayoría, catalizadores proteínicos de reacciones químicas; a éstas se le unen los sustratos (compuesto sobre el cual actúa la enzima) en el sitio activo, interaccionanelectrostáticamente con los grupo R del sitio activo, reaccionan y salen como productos. Los catalizadores son agentes químicos que modifican la velocidad de las reacciones químicas sin ser consumidos en el proceso, esto lo logran disminuyendo la energía de activación, energía necesaria para romper los enlaces químicos existentes e iniciar la reacción que conducirá a la formación de los nuevos enlaces. Es importanteresaltar que existen diversas enzimas, algunas de ellas son las peptidasas (las cuales ‘’rompen’’ enlaces peptídicos) y las oxidorreductasas (oxidan diversos compuestos); todas las enzimas se ven afectadas por factores como temperatura, pH y concentración (Campbell y Reece, 2007; Karp, 2010).
A pesar de que muchas de las reacciones que se llevan a cabo en la célula son exergónicas (es decir queocurren de forma espontánea y sin aporte de energía) estas tienen la barrera de la energía de activación, la cual debe ser superada. Sin las enzimas las reacciones tardarían años en suceder (y las células requieren la liberación constante de energía para llevar a cabo todas sus funciones) y el calor que sirve como fuente para alcanzar el estado de transición, aceleraría todas las reacciones,hasta las innecesarias y desnaturalizaría muchas de las biomoléculas esenciales para las células. La alternativa a esto es la catálisis, en la cual una reacción química que es energéticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy baja, sea cinéticamente favorable y sin un aumento drástico de la temperatura. En síntesis, las enzimas son los ‘’directores’’ de las distintas vías metabólicas queusan las células para transformar la energía. (Campbell y Reece, 2007; Karp, 2010).
Objetivo general
Constatar la actividad de diferentes enzimas sobre sus respectivos sustratos
Objetivos específicos
Apreciar el efecto catalítico de la catalasa a diferentes temperaturas y pHs.
Comprobar la capacidad catalítica de la bromelina a diferentes temperaturas .
Observar la capacidad catalítica de larennina sobre su sustrato.
Materiales y reactivos
Ananas comosus.
Vasos de precipitado.
Peróxido de hidrógeno
Higado de B. primigenius.
Papel de pH
Pinza.
Citrus × limon.
Mechero Bunsen.
Pipetas.
Solanum lycopersicum.
Termómetro.
Propipetas.
Leche y cuajada de B. primigenius
Hidróxido de sodio.
Regla.
Gelatina
Agua destilada.
Vasos de compota
Trípode
Hielo.
Bolsa térmica
Tubos de ensayo.
Bicarbonatode sodio
Mortero.

Métodos
Experimento N°1 Catalasa (peroxidasa)
Parte A (pH)
1) Se exprime un limón (C. x limón) y se tritura un S. lycopersicum. Después el zumo se filtra y se coloca en frascos de compota separados.
2) Con la ayuda de una pipeta y una propipeta se extrae 1 ml de cada zumo y se coloca en dos tubos de ensayo.
3) Se extraen 2 ml de agua destilada y se coloca 1ml en un tubo de ensayoy 1 ml en otro tubo de ensayo. Se extraen 2ml de agua destilada y se vierte en otro tubo de ensayo.
4) Se coloca 0,09 g de bicarbonato de sodio en un 1 ml de agua destilada y 1.5 g de hidróxido de sodio en 2 ml de agua destilada; el otro tubo de ensayo que sobró con agua destilada no se le agrega ningún soluto.
5) Se agrega a las cinco soluciones (en sus respectivos tubos de ensayo) pedazos dehígado (de 1 gr) previamente triturados y cortados. En un sexto tubo de ensayo que no contiene ninguna solución, se agrega un trozo de hígado.
6) Se agrega peróxido de hidrógenos y se mide la columna de burbujas.
Parte B (temperatura)
1) En un vaso de precipitado de 500 se vierten 200 ml de agua y se colocan a enfriar en hielo por 15 minutos.
2) Luego en 8 tubos de ensayo se coloca 1 mg de...