Enzimohistoquimica
Páginas: 2 (266 palabras)
Publicado: 5 de junio de 2014
Histoquímica enzimática
Las técnicas histoquímicas también se utilizan para identificar y localizar enzimas en células y tejidos
Para localizar enzimas en loscortes histológicos debe tenerse especial cuidado durante la fijación para que se
preserve la actividad enzimática. La fijación aldehidica débil suele ser el método preferido.En estos procedimientos se detecta el producto de la reacción de la actividad enzimática y no la enzima propiamente dicha. En general se usa un reactivo de captura, quepuede ser un colorante o un metal pesado, para atrapar o fijar el producto de la reacción de la enzima mediante precipitación en el sitio de la reacción. En una reacción típica patadetectar una enzima hidrolitica, el corte histológico se coloca en una solución que contiene un sustrato (AB) y un agente de atrapamiento (T) que precipitará uno de losproductos como sigue:
en. donde AT es el producto final atrapado y B es el sustrato hidrolizado.
Mediante el uso de este tipo de técnicas se pudo equiparar el lisosoma.identificado por primera vez en estudios celulares de centrifugación diferencial, con un componente vacuolar visible en las micrototografias
electrónicas. En los tejidos sometidos auna fijación débil las hidrolasas acidas y las esterasas contenidas en
los lisosomas reaccionan con un sustrato adecuado. La mezcla reactiva también contine iones de plomo paraprecipitar, por ejemplo, fosfato de plomo derivado de la acción de la fosfatasa acida. Luego el producto de reacción precipitado puede verse tanto con microscopía óptica comocon microscopía electrónica.
Referencias
Ross, M. (2008) Histologia: texto y atlas color con biologia celular y molecular. (5 ed.) Buenos Aires: Medica Panamericana.
Las técnicas histoquímicas también se utilizan para identificar y localizar enzimas en células y tejidos
Para localizar enzimas en loscortes histológicos debe tenerse especial cuidado durante la fijación para que se
preserve la actividad enzimática. La fijación aldehidica débil suele ser el método preferido.En estos procedimientos se detecta el producto de la reacción de la actividad enzimática y no la enzima propiamente dicha. En general se usa un reactivo de captura, quepuede ser un colorante o un metal pesado, para atrapar o fijar el producto de la reacción de la enzima mediante precipitación en el sitio de la reacción. En una reacción típica patadetectar una enzima hidrolitica, el corte histológico se coloca en una solución que contiene un sustrato (AB) y un agente de atrapamiento (T) que precipitará uno de losproductos como sigue:
en. donde AT es el producto final atrapado y B es el sustrato hidrolizado.
Mediante el uso de este tipo de técnicas se pudo equiparar el lisosoma.identificado por primera vez en estudios celulares de centrifugación diferencial, con un componente vacuolar visible en las micrototografias
electrónicas. En los tejidos sometidos auna fijación débil las hidrolasas acidas y las esterasas contenidas en
los lisosomas reaccionan con un sustrato adecuado. La mezcla reactiva también contine iones de plomo paraprecipitar, por ejemplo, fosfato de plomo derivado de la acción de la fosfatasa acida. Luego el producto de reacción precipitado puede verse tanto con microscopía óptica comocon microscopía electrónica.
Referencias
Ross, M. (2008) Histologia: texto y atlas color con biologia celular y molecular. (5 ed.) Buenos Aires: Medica Panamericana.
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