equipo hplc

INTRODUCCIÓN
En la cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna que contiene a la fase fija. La separación cromatográfica en HPLC es el resultado de las interacciones específicas entre las moléculas de la muestra en ambas fases, móvil y estacionaria
A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto rendimiento (HPLC, dehigh-performance liquid chromatography) no está limitada por la volatilidad o la estabilidad térmica de la muestra.
La HPLC es capaz de separar macromoléculas y especies iónicas, productos naturales lábiles, materiales poliméricos y una gran variedad de otros grupos poli funcionales de alto peso molecular. Con una fase móvil líquida interactiva, otro parámetro se encuentra disponible para laselectividad, en adición a una fase estacionaria activa.
La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor gama de estas interacciones selectivas y más posibilidades para la separación.
La cromatografía líquida de alto rendimiento se utiliza en las ramas de la bioquímica para separar e identificar compuestos en base a su polaridad. El dispositivo emplea una bomba queactúa para crear una presión lo suficientemente alta como para forzar al compuesto a separarse en partículas polarizadas a través del dispositivo.
Ventajas:
El HPLC es un proceso automático que toma sólo unos pocos minutos para producir resultados. Esta es una marcada diferencia en la cromatografía líquida que utiliza la gravedad en lugar de una bomba de alta velocidad para forzar compuestos através de un tubo densamente empaquetado. Los resultados obtenidos son de una alta resolución y son fáciles de leer, y las pruebas se reproducen con facilidad a través del proceso automatizado
Desventajas:
Es difícil de detectar coelución (dos compuestos que escapan de la tubería a la vez) con HPLC, lo que puede dar a la categorización de compuesto incorrecto. Existe un alto costo para el equiponecesario para llevar a cabo HPLC. Su funcionamiento puede ser complejo y requiere un técnico entrenado para operar. Debido a la velocidad del proceso, el equipo tiene una baja sensibilidad a algunos compuestos.








FUNDAMENTO


La cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) es un proceso analítico que utiliza un instrumento especialmente diseñado para separar, cuantificar yanalizar los componentes de una mezcla química. La muestra de interés se hace pasar mediante un flujo de disolvente hasta una columna rellena del material especial para llevar a cabo la separación de los componentes, posteriormente dichos componentes pasan a un sistema de detección acoplado con un sistema de grabación de datos. Los componentes básicos del sistema HPLC incluyen: contenedor dedisolventes, inyector automático, bomba cuaternaria, columna analítica, detector/es y el registrador de datos. Los detectores de los que se dispone son 2: (a) detector ultravioleta-visible de longitud de onda variable y (b) detector LSD (evaporative light-scattering detector). Posee un ordenador donde se incluye el programa Chemstation para controlar tanto los instrumentos como los datos obtenidos. Campos de Aplicación de HPLC

Fármacos: Antibióticos, sedantes esteroides, analgésicos
Bioquímica: Aminoácidos, proteínas, carbohidratos, lípidos
Productos de alimentación: Edulcorantes artificiales, antioxidantes, aflatoxinas, aditivos
Productos de la industria química: Aromáticos condensados, tensoactivos, propulsores, colorantes
Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB
Químicaforense: Drogas, venenos, alcohol en sangre, narcóticos
Medicina clínica: Ácidos biliares, metabolitos de drogas, extractos de orina, estrógenos.
Se realizan análisis cualitativos y cuantitativos de polifenoles y carotenos en una amplia variedad de matrices alimentarias y biológicas (cítricos, uvas, vinos, orina, plasma, entre otros).











OBJETIVOS
Aprender y dar a conocer...