ESCALA NEFELOMÉTRICA DE MACFARLAND



Facultad de Bioanálisis
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Practica # 10
ESCALA NEFELOMÉTRICA DE MACFARLAND
OBJETIVO.
El alumno aprenderá a preparar y usar los tubos de escala nefelométrica de MacFarland.GENERALIDADES.
El patrón nefelométrico de MacFarland consiste en una serie de tubos con diferentes grados de turbidez que se utilizan, en forma comparativa para ajustar con rapidez la concentración debacterias en una suspensión sin necesidad de ningún instrumento de laboratorio.
La turbidez se logra al combinar ácido sulfúrico al 1 % con cloruro de bario al 1% de acuerdo a la reacción:
H2SO4 + BaCl2 2HCl + Ba SO4 
Al combinar en diferentes proporciones los dos reactivos el sulfato de bario precipitará en mayor cantidad a medida que se incrementa la proporción de cloruro de bario, eseprecipitado dará una turbidez que será equivalente a la turbidez que resultaría de un numero cada vez mayor de bacterias por ml. en la suspensión. Así pues tenemos tubos que equivalen en turbidez asuspensiones bacterianas de concentración conocida pero con la ventaja de que son estables hasta por seis meses si se protegen de la luz.
MATERIAL POR EQUIPO
1 gradilla
11 tubos 15x150 con tapón derosca
110 ml. de ácido sulfúrico 1%
10 ml. de cloruro de bario 1%
2 pipetas de 1 ml. (no se requieren estériles)
1 pipeta de 10 ml. (no se requiere estéril)
PREPARACIÓN DE LOS TUBOS DE LA ESCALADE MACFARLAND.
Para preparar la escala se utilizan tubos que no presenten rayaduras en los cuales se vierte como ya se menciono ácido sulfúrico al 1 % el cual se adiciona a una solución de clorurode bario al 1% de acuerdo a la siguiente tabla: MANUAL DE MICROBIOLOGÍA GENERAL Universidad Veracruzana Facultad de Bioanálisis
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Número de tubo
BaCl2 (1%)
ml.
H2SO4 (1%)
ml.
Turbidezequivalente bacterias / ml.
0.5
0.05
9.95
150 X 106
1
0.1
9.9
300 X 106
2
0.2
9.8
600 X 106
3
0.3
9.7
900 X 106
4
0.4
9.6
1200 X 106
5
0.5
9.5
1500 X...