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INTRODUCCIÓN

La forma más simple de preparar un espécimen para su examen microscópico es hacer una preparación en fresco. Existen dos técnicas, una preparación en fresco simple (entre porta ycubre) consiste en colocar una gota de liquido con los microorganismos sobre un porta objetos y a continuación cubrirla con un cubre objetos. Las preparaciones en fresco se utilizan para observarmicroorganismos vivos por ejemplo, para la búsqueda de Trichonomas vaginalis en secreciones vaginales.
Sin embargo, el inconveniente de la observación en fresco es que no permite aumentar el contrate de lapreparación. Por tanto, su uso, con un microscopio óptico de campo claro, está bastante limitado.
Una de las más importantes coloraciones es la llamada Tinción de gran. Es muy simple y la más usadapor los bacteriólogos, pues por medio de ella, las bacterias pueden ser clasificadas en dos grandes grupos: unas llamadas gran positivas y otras denominadas Gram negativas. Además de notarse lareacción al Gram deberá mostrar la forma de las bacterias (cocos, bastones, fusiforme y otros).

Objetivos
• Practicar la tinción gran
• Determinar la clasificación de las bacterias en estudio
• Anotarsu forma y disposición

Material y Métodos
A. MATERIAL BIOLÓGICO
Cultivo propagados en caldo nutritivo de 24 horas de edad de:
• Escherichia Coli
B. REACTIVOS QUÍMICOS
• Aceites de inmersión
Unjuego de colorantes para tinción de gran
• Cristal violeta
• Solución de yodo
• Alcohol-Acetona
• Safranina
C. MATERIAL Y EQUIPO
• Asas bacteriológicas
• Portaobjetos limpios sin grasa
•Mechero
• Microscopio

D. PROCEDIMIENTO
1. Preparación del frotis
• En un portaobjetos, limpio y sin grasa, se coloca una gota de agua destilada estéril
• Se esteriliza el asa y se toma una muypequeña cantidad del cultivo
• Se coloca la muestra en la gota de agua y se extiende en un espacio de 1 cmᶟ , hasta la sequedad total
• Se toma la laminilla y se fija el material biológico...