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Objetivo
En esta práctica realizaremos la extracción del ADN de células animales poniendo de manifiesto su estructura fibrilar y el extraordinario grado de arrollamiento, que permite elempaquetamiento en el núcleo celular de larguísimas cadenas de esta molécula.
Tras la extracción se realizará una tinción específica del ADN obtenido.
Material necesario
- Tejido animal (hígado de pollo)- Mortero o batidora
- Embudo
- Trozo de tela para filtrar
- Arena (si se usa mortero)
- Probeta
- Pipeta)
- Varilla de vidrio
- Vaso de precipitados
- Alcohol 96º
- Solución de NaCl 2M
-Detergente tipo lavavajillas
 
 
Fundamento
El ADN se encuentra en el interior del núcleo celular, disperso y muy replegado, unido a proteínas para formar la cromatina. Así, para extraerlo seránecesario homogeneizar el tejido y romper las células para separar el núcleo, romper también la envoltura nuclear para liberar su contenido, luego separar el ADN de las proteínas que lo protegen y, porúltimo, precipitarlo para extraerlo de la solución. Una vez realizado esto, el ADN aparecerá como un agregado de fibras blanquecinas que se adhieren a la varilla de vidrio. Por último, se puede situarsobre un porta, teñirlo con un colorante básico y observarlo al microscopio.
Procedimiento
Triturar en frío la muestra de hígado en el mortero junto con arena o mediante la batidora parahomogeneizar el tejido. Este procedimiento también rompe muchas células liberando su contenido. Parecer ser más eficaz el empleo de una batidora, con la que se obtiene una mezcla más homgénea y fácil de filtrardespués.
 
        
 
Añadir unos 50 ml de agua destilada o, en su defecto, agua mineral, y remover suavemente pero mezclando a fondo.
Filtrar varias veces el resultado a través de un pedazo detela. Un pañuelo viejo de algodón va bien. Este filtrado es lento y difícil, pero retendrá en el pañuelo restos de tejido.
 
        
 
Añadir al filtrado resultante un volumen igual de solución...