ESPECTOFOMETRIA INFORME

UNIVERSIDAD CATOLICA DE LA SSMA CONCEPCION
Facultad De Ciencias / I Semestre 2010
U.A 37 / BIO 0221 / Biooquimica /Laboratorio





Practico N º 1:
“Métodos Usados en Bioquímica: Espectrofotometría”





Integrantes: Valentina RamírezKarina Villalobos

Curso: BIO 0221Laboratorio

Sección: 3

Docente: Paulina Salas

Fecha: 06/05/ 2010




INTRODUCCIÓN
Unespectrofotómetro es un instrumento usado en la física óptica que sirve para medir, en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones. También es utilizado en los laboratorios de química para la cuantificación de sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotómetros, puede ser de absorción atómica oespectrofotómetro de masa.
Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones:
1. Dar información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra
2. Indicar indirectamente que cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en la muestraFuente de luz
La misma ilumina la muestra. Debe cumplir con las condiciones de estabilidad, direccionabilidad, distribución de energía espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son lámpara de wolframio (también llamado tungsteno), lámpara de arco de xenón.kl y lampara de Deuterio que es utilizada en los laboratorios atomicos.
Monocromador
El monocromador aísla las radiaciones de longitudde onda deseada que inciden o se reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromática. Está constituído por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersión. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida Es un lente que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma el cual separa todas las longitudes de ondade ese haz y la longitud deseada se dirige hacia otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de salida.
Compartimiento de Muestra
Es donde tiene lugar la interacción, R.E.M con la materia (debe producirse donde no haya absorción ni disperisón de las longitudes de onda). es importante destacar, que durante este proceso, se aplica la ley de lambert-beer en su máxima expresión, en base a susleyes de absorción, y lo implica esto, en lo que concierne a el paso de la molécula de fundamental-excitado.
Fotodetectores
En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotodetectores para percibir la señal en forma simultánea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes móviles del equipo.
La espectrofotometría es elmétodo de análisis óptico más usado en las investigaciones químicas y biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
Principio de la Espectrofotometría
Todas las sustancias pueden absorber energía radiante,...