Espectofotometro

“Espectrofotometría”
-PROCEDIMIENTOLABORATORIO BIOQUÍMICA I PRÁCTICA NO. 1 BR. MARIANA HERRERA/BR. PAOLA MORA

Objetivos…
 Principal

Determinar la concentración de CoCl2 de una muestraproblema. Determinar experimentalmente el espectro de absorción de una sustancia conocida.  Aprender a determinar la concentración de una solución por métodos espectrofotométricos.  Llevar a cabo lacalibración del espectrofotómetro por métodos sencillos.


 Específicos

Principios Reacciones..
 CoCl2  El cloruro de cobalto es un polvo cristalino azul.  Se utiliza como indicador dehumedad y como pigmento.  Longitud de onda teórica: (rosado) 510nm

Procedimiento…
 Determinación del Espectro de Absorción.

Medir la absorbancia del CoCl2 0.2 M cada 20 nm (400-600nm) 3 ml de HCl1% BLANCO DE REACTIVO

3 ml de CoCl2 0.2 M en HCl 1%

Observar y anotar

Procedimiento…

Procedimiento…
 Curva de Calibración.

Medir la absorbancia del CoCl2 a la longitud de ondaanalítica. 3 ml de HCl 1% BLANCO DE REACTIVO

3 ml de CoCl2 (0.01, 0.05, 0.10, 0.15, 0.20 M)

Anotar absorbancias

Procedimiento…
 Obtención de la Curva de Calibración.
Cubeta No.
1 2 3 4Concentración CoCl2
0.01 M 0.05 M 0.10 M 0.15 M

Absorbancia
a b c d

5

0.20 M

e

Absorbancia

y = mx + b;

Donde y es la absorbancia y x es la concentración.

ConcentraciónProcedimiento…
 Determinación de la Concentración de una Muestra

Problema (?).

Medir la absorbancia del CoCl2 a la longitud de analítica
x

x

x

x

x 3 ml de HCl 1% BLANCO DE REACTIVO

3ml de CoCl2 de x concentración

Anotar absorbancias

Procedimiento…
 Cálculo

y = mx + b

de la Concentración de una Muestra Problema (?).

Absorbancia

(y – b) /m = x ?Concentración

Reporte ¿?…
 Graficar:





 Discutir (No es cuestionario):


Espectro de absorción (Excel) Curva de calibración (Excel) Ubicar muestra problema dentro de la curva de...