Espectrofotometria Uv Vis

ESPECTROFOFTOMETRIA DE ABSORCION VISIBLE (VIS)

DETERMINACION DE NITRITOS

I. Fundamento:

El método se basa en la interacción de la energía radiante con la materia, reforzado por la Ley de Lambert-Beer, para el cual existe una relación entre la intensidad de la a luz incidente con la luz transmitida en función de la concentración del analito a ser determinado.

II.Objetivos

• Tratamiento de la muestra de embutidos.

• Elaboración de la curva de calibración para nitritos (NO2)

• Determinara la concentración de nitritos en las muestras de embutidos y agua.




III. Marco teórico.

• Espectrofotometría o Espectroscopia de Absorción

Es el método óptico basado en la medida directa de laabsorción de radiación electromagnética por parte de una muestra, cuantificable a través de la Absorbancia y la correlación de esta variable con la concentración de la especie de interés en dicha muestra.

Todo analito molecular tiene la capacidad de absorber ciertas longitudes de onda característica de la radiación electromagnética. Dicha disminución, debida a la absorción experimentada porel analito, puede ser cuantificada utilizando diversas magnitudes, siendo la Absorbancia, a la más comúnmente utilizada en la espectrofotometría de UV-VIS. Dicha absorbancia se define por la expresión:

[pic]

Donde A es la absorvancia, Ii la intensidad del haz de radiación incidente y It la intensidad de dicho haz luego de atravesar la muestra

Ley de Lambert- Beer:De acuerdo con la Ley de Lambert- Beer, la absorbancia está relacionada linealmente con la concentración de la especie absorbente, C, y con la longitud de la trayectoria de la radiación en el medio absorbente, b. esto es:

[pic]

Donde “a” es una constante de absortividad. Cuando la concentración “c” se expresa en moles por litro, y “b” en centímetros, la constantede proporcionalidad se denomina absortividad molar, y se designa por el símbolo “e” y puesto que la absorbancia es una magnitud a dimensional, tendrá unidades de L cm -1mol-1. En este caso la ley de Beer adquiere la forma de:

A= ebc

• Absorbancia(A)

La espectroscopia de absorción molecular se basa en la medida de la transmitancia (T) o de absorbancia (A) desoluciones de una celda transparente y con una longitud de trayectoria b(cm).

Por lo que la absorbania (A) se define mediante la ecuación

A=-logT

• Transmitancia

Como consecuencia de interacciones entre fotones y las partículas (átomos y/o moléculas) absorbentes, la potencia del haz de luz es atenuada. La transmitancia T de la solución es entonces lafracción de la radiación incidente transmitida por la solución. La transmitancia T se expresa a menudo como porcentaje:






• Curva de calibración

Para verificar el cumplimiento de la ley de Lambert- Beer se debe realizar la curva de calibración, absorbancia (A) en función de la concentración(c), para lo cual se preparan las soluciones con la sustancia diferentesconcentraciones y se mide la absorbancia a la longitud de la onda elegida.

• Espectro de Absorción

Un espectro de absorción es una representación grafica de la absorbancia del analito en función de la longitud de onda de la radiación. El máximo de absorbancia obtenido en el espectro de absorción de una analito, nos dará la, longitud de onda que proporciona la mayorsensibilidad posible y por lo tanto será la que se utilizara en el análisis espectrofotométrico de dicho analito. A esta longitud de onda se le denomina Lambda Analito




IV. Parte experimental.

Materiales y equipos

• Fiolas

• Pipetas

• Probetas

• Vasos de precipitado

• Bomba de Vacio

•...