Espectrofotometria

ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION MOLECULAR VISIBLE

En un espectrofotómetro típico la luz blanca que emana una lámpara de tungsteno pasa por una ranura y es dispersada por una rejilla de difracción. De este haz dispersado se selecciona una angosta banda de longitud de onda similar (idealmente monocromática), pasa a través de una segunda ranura y la solución de muestra. Laintensidad de radiación que no es absorbida por la muestra es medida electrónicamente. (%T)

Objetivos
* conocimiento de la instrumentación y manejo de un espectrofotómetro.
* obtención de la información de un espectro y cálculo del rango de concentraciones de trabajo
* uso de métodos de cuantificación por curva de calibración y adición estándar
* determinación de parámetros de calidadanalítica.

Equipos Y Materiales
* Espectrofotómetro de doble haz UVvis. UNICAM UV2, para obtención de espectros y medidas puntuales.
* Espectrofotómetro monohaz , Vis. METERTEK
* Cubetas plásticas 1 cm paso óptico
* Matraces aforados 100 y 50 mL
* Bureta 25 mL
* Pipetas aforadas de 10 mL
* Propipetas
* Piseta
* Vaso pp 400 mL
* Pañuelos desechables opapel tissue
* Calculadora científica (alumno)

SESION 1

A) ESPECTROS DE ABSORCION DE UNA SOLUCION COMPLEJO CuAMONIACAL Cu(NH3)4++

Se disponen las siguientes soluciones en el laboratorio:
* solución de CuSO4 0,079 M = 5000 mg/L Cu++
* solución de amoníaco 2,6 M (en dispensador)

1) Prepare una solución de complejo amoniacal de Cu++ de 500 mg/L por dilución de unasolución de Cu++ de 5000 mg/L y con adición de amoníaco para obtener una concentración final de 0,26 M.

2) Registro del espectro de absorción
Haga un barrido manual de longitudes de onda entre 400800 nm para el complejo (instrumento monohaz, Metertek). Use una solución respectiva de amoníaco como referencia. Cada vez que modifique la longitud de onda, recalibre el instrumento a 100%T con lasolución de referencia. Registre A o el % T para cada longitud de onda y grafique los resultados obtenidos.
Establezca la longitud de onda de máxima absorbancia en su equipo y la A de la solución de 500 mg/L

3) Con los datos obtenidos de A para la solución de 500 mg/L calcule los rangos de concentración para preparar una curva de calibración en la zona de menor error (20 y 70 % T)4) Diseñe un esquema de dilución para preparar 6 puntos para la curva de calibración.

B) LEY DE BEER, CURVA DE CALIBRACION

Se comprueba si la sustancia a analizar obedece la ley de Beer al graficar Absorbancia vs concentración, para una serie de soluciones con diferente concentración conocida. El ancho de la cubeta (1 cm) y la longitud de onda se mantienen constantes.
* Ajusteel 0 de absorbancia colocando solución blanco en el haz de medición.
* Mida A (%T) para cada una de las soluciones preparadas anteriormente, grafique y calcule la ecuación de la recta por ajuste de mínimos cuadrados.
* Registre la tabla de datos A vs C en su cuaderno.
* Determine la ecuación de la recta de calibración y el coeficiente de correlación.
* Prepare la muestraproblema que se le asignará en el laboratorio de manera similar a las soluciones estándares.
* Interpole su muestra en la curva de calibración, mínimo 4 repeticiones.
* Calcule la concentración de la muestra recibida, considerando la dilución efectuada.
* Discuta los resultados obtenidos
* Exprese la constante de Beer en diferentes unidades: a ,ε ,ε1cm1%
* Calcule el error en laconcentración para mediciones de 5 y 95 % T

SESION 2

A) Repita las experiencias efectuadas en la sesión 1, pero utilizando el Espectrofotómetro UV-VIS de doble haz UNICAM UV-2.
Las instrucciones de uso de este instrumento serán señaladas en el laboratorio.
En el espectrofotómetro UNICAM es posible determinar la curva de calibración usando el menú Medición Cuantitativa e interpolar la...