Espectrofotometria

OBJETIVOS:
• Determinar las longitudes de onda óptima para los reactivos DNS y Azul de Bromofenol.
• Identificar la exactitud y precisión fotométrica delinstrumento en las longitudes de onda de 500-505 nm.
• Analizar si se cumple el criterio de estabilidad fotométrica en la correspondiente prueba en las longitudes deonda de 500-505 nm.



PROCEDIMIENTOS:
PAREAMIENTO DE CUBETAS TO=37 OC
LONGITUD DE ONDA ABSORBANCIA
505 0,067
0,065

LECTURA ESPECTRO DE ABSORCIÓN PARADNS
REACTIVO DNS
LONGITUD DE ONDA (nm) ABSORBANCIA
340 2,521
405 1,654
420 2,410
450 2,405
505 2,522
546 0,151
578 0,022
670 -0,003
TABLA 1 LECTURAABSORBANCIA DNS

LECTURA ESPECTRO DE ABSORCIÓN PARA AZUL DE BROMOFENOL
REACTIVO AZUL DE BROMOFENOL
LONGITUD DE ONDA (nm) ABSORBANCIA
340 0,499
405 0,743
4200,791
450 0,868
505 1,016
546 2,194
578 2,605
670 0,001
TABLA 2 LECTURA ABSORBANCIA AZUL DE BROMOFENOL


GRÁFICO 1 Lectura espectro de absorción parareactivos: DNS y Azul de Bromofenol

LONGITUD DE ONDA ÓPTIMA (nm)
DNS AZUL DE BROMOFENOL
505 578
TABLA 3 Longitud de Onda Óptima de los Reactivos analizados3. CONTROL DE EXACTITUD Y PRECISIÓN FOTOMÉTRICA

PAREAMIENTO DE CUBETAS TO=37 OC
RANGO:
LONGITUD DE ONDA ABSORBANCIA
500-505 0,073
0,074
0,072CONTROL DE EXACTITUD Y PRECISIÓN FOTOMÉTRICA
ABSORBANCIA ESPERADA: 0.547
COLOR REACCIÓN: ROSADO
LONGITUD DE ONDA (nm) ABSORBANCIAS
500-505 0,5370,538
0,539
0,540
0,540
0,540
0,540
0,540
0,541
0,540
PROMEDIO 0,540
DS 0,001178511

TABLA 3 Control de Exactitud y Precisión Fotométrica